集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)及品牌代理為一體的生物技術(shù)公司,目前可提供各種抗體、免疫學(xué)相關(guān)的檢測(cè)試劑盒、胎牛血清,動(dòng)物抗血清等高品質(zhì)產(chǎn)品及服務(wù),涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)領(lǐng)域。
CAS | 原裝 ,有質(zhì)量問題包退換 | 純度 | LR實(shí)驗(yàn)試劑 |
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分子量 | 咨詢 | 分子式 | 電話咨詢 |
供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | 96T/48T |
貨號(hào) | 10360 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 用于科研 |
人白細(xì)胞介素26(IL-26)elisa試劑盒
為了建立人白細(xì)胞介素-35 (IL-35) 的定量ELISA檢測(cè)方法,RT-PCR 克隆了人IL-35的IL-27EBI3亞基和IL-12p35亞基的編碼基因,在大腸桿菌中實(shí)現(xiàn)了2個(gè)亞基的高效表達(dá).以大腸桿菌表達(dá)的IL-27EBI3和IL-12p35重組蛋白作為免疫原,免疫BaLb/c小鼠,選取陽性血清小鼠的脾細(xì)胞與小鼠骨髓瘤SP2/0細(xì)胞融合,用間接ELISA和有限稀釋法進(jìn)行單克隆雜交瘤細(xì)胞的篩選和克隆,獲得了穩(wěn)定分泌抗IL-27EBI3和抗IL-12p35單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株.在效價(jià)測(cè)定和特異性鑒定的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步篩選出一株能穩(wěn)定分泌抗IL-27EBI3單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株3B11和一株能穩(wěn)定分泌抗IL-12p35 單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株3A10,亞類鑒定兩株單抗均為IgG1.應(yīng)用單抗3B11和3A10建立了IL-35雙抗夾心定量ELISA檢測(cè)方法,借助生物素-親和素放大效應(yīng),該方法檢測(cè)IL-35線性范圍為3.12–200 pg/mL,低檢測(cè)限為1.26 pg/mL,與多種其他抗原的交叉反應(yīng)率為0.1%,批內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差 (RSD) 為5.1%–5.6%,批間RSD為5.6%–7.2%,添加回收率為89%–103%,達(dá)到定量分析的要求,為進(jìn)一步組裝IL-35定量ELISA檢測(cè)試劑盒打下了基礎(chǔ).煤焦瀝青煙提取物(coal tar pitch smoke extract,CTP)刺激人支氣管上皮細(xì)胞(BEAS-2B)是否發(fā)生炎性凋亡(pyroptosis).方法 用l、3μg/ml的CTP分別染毒BEAS-2B細(xì)胞8、24 h,以二甲基亞砜(DMSO)為對(duì)照,用乳酸脫氫酶(lactic dehydrogenase,LDH)活力測(cè)定試劑盒和白細(xì)胞介素-1β(Interleukin-1 beta,IL-1β) ELISA試劑盒分別檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清中的LDH活力和IL-1β含量,用半胱氨酸天冬氨酸特異性蛋白酶-1(caspase-1)活力測(cè)定試劑盒檢測(cè)細(xì)胞caspase-1活力.結(jié)果 染毒8h,1、3 μg/ml CTP染毒組細(xì)胞中caspase-1的活力分別為(9.29±0.30) μmol/ml和(8.67±0.59) μmol/ml,均明顯高于DMSO對(duì)照組[(7.42±0.59) μmol/ml],差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);1、3μg/mlCTP染毒組LDH活力和IL-1β含量與DMSO對(duì)照組的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05).染毒24 h時(shí),1、3μg/ml染毒組與DMSO對(duì)照組細(xì)胞中caspase-1活力差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);1、3μg/ml染毒組培養(yǎng)液上清中LDH活力[(1323.03±28.53)、(1148.45±16.42) U/dl]和IL-1β含量[(125.37±25.00)、(92.04±19.09) pg/m]均高于對(duì)照組[LDH:(1091.93±26.64) U/dl,IL-1β:(46.20±14.43) pg/ml],差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05).結(jié)論 煤焦瀝青煙提取物刺激BEAS-2B細(xì)胞早期caspase-1活力升高,繼之LDH酶活力。人白細(xì)胞介素26(IL-26)elisa試劑盒