山羊抗小鼠（未標(biāo)記）

編號：YKCP-201-UC

小鼠產(chǎn)生的抗體分子中的Fc端，相對于山羊來說，也是一個異源性物質(zhì)，可以刺激山羊的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生針對小鼠抗體分子Fc端的特異性抗體，就是山羊抗小鼠抗體的抗體，即山羊抗小鼠二抗。

山羊抗小鼠（未標(biāo)記）

抗體制備（過表達(dá)體系WB應(yīng)用保證）

服務(wù)編號：YKSP-1012          

服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)：
   1.ELISA≥1:40000
   2.抗體(抗原親和純化)：3-5 mg
   3. Western實(shí)驗(yàn)中能夠特異性識別目的蛋白（過表達(dá)體系）

服務(wù)內(nèi)容：
   1. 根據(jù)蛋白序列，設(shè)計(jì)3條可能成功制備抗體的多肽序列
   2. 多肽合成：每條多肽 10 mg, 純度 ≥ 85%
   3. 多肽偶聯(lián)（KLH用于免疫，BSA用于檢測）
   4. 4只兔子，采集免疫前血清，進(jìn)行4次免疫
   5. 血清小樣采集和檢測
   6. 抗血清效價符合標(biāo)準(zhǔn)，采全血，分離抗血清
   7. 多肽偶聯(lián)到親和樹脂
   8. 抗血清用抗原親和柱純化
   9. 選擇Elisa效價合格的抗體進(jìn)行Western 驗(yàn)證（客戶提供的過表達(dá)裂解液）

終交付的材料：
   1.1-2 mg抗體;
   2.1 mg多肽，0.1 mg多肽-BSA偶聯(lián)物
   3.Elisa數(shù)據(jù)報告，WB檢測報告，完整項(xiàng)目報告

第1個要求-功能性要求：科研人員根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求提出對抗體的功能性要求;對一個抗體功能要求越多，其制備難度也就越大。

第2個要求-便利性要求:科研工作者對抗體提出需求,首先應(yīng)考慮商品化抗體:優(yōu)質(zhì)商品化抗體一般都經(jīng)過多層驗(yàn)證和優(yōu)化,可以直接購買使用,節(jié)約時間。一個抗體很難同時滿足幾項(xiàng)功能要求，這個時候可以考慮分別選購針對不同功能的抗體；除此之外，還需仔細(xì)查看抗體數(shù)據(jù)信息和實(shí)驗(yàn)圖片，其實(shí)驗(yàn)所采用的標(biāo)本和方法與自己準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)的標(biāo)本越相似越好。

第3個要求-抗體種屬要求: 制備多抗選用多的是兔子，單抗選用多的是小鼠，對于抗體需求量較大，比如二抗，一般選擇山羊。對于其他種屬要求，除實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)需求，更多是因?yàn)榭乖c免疫宿主親緣關(guān)系問題，一般來說親緣關(guān)系越遠(yuǎn)，免疫原性越好。

第4個要求-品質(zhì)性要求：大部人認(rèn)為單抗比多抗好,其實(shí)也不盡然。單抗的特異性好，對于需要區(qū)分鑒定同源性較高的抗原或者對于特異性要求較高時，一般選擇單抗；另外，單抗性質(zhì)比較穩(wěn)定，理化性質(zhì)均一（所有的抗體都是由相同細(xì)胞分泌出來）。多抗的優(yōu)點(diǎn)是效價和靈敏度高，其針對一個抗原的多表位；與單抗相比，待檢標(biāo)本中同樣的蛋白表達(dá)豐度，多抗會有更多抗體分子與抗原結(jié)合，信號更強(qiáng)，當(dāng)然也可能引起非特異性問題。

第5個要求-可能性要求：好的抗原是制備優(yōu)質(zhì)抗體的前提，在制備抗體之前必須有可能制備出好的抗原。如果已經(jīng)有抗原，可以直接免疫動物；如果沒有抗原需要從其已獲得的信息或者材料入手制備抗原：序列信息-基因-重組表達(dá)-蛋白純化-動物免疫。對于同源序列較高的蛋白序列也可以考慮通過設(shè)計(jì)合成多肽偶聯(lián)載體制備抗原。制備的抗原都是通過人工合成或者生物反應(yīng)器得到的“模擬抗原”，與天然抗原還是有一定的差異的。獲得天然抗原的辦法可以直接從組織或標(biāo)本中提取蛋白，前提是這個蛋白在標(biāo)本中表達(dá)量大且其理化性質(zhì)穩(wěn)定。

第6個要求-可評價要求：篩選方案和純化方法對抗體制備至關(guān)重要，質(zhì)檢方法決定一個抗體的命運(yùn)，你用什么篩選方法你就得到什么樣的抗體，所以在抗體制備之前必須要保證建立一個科學(xué)穩(wěn)定符合質(zhì)檢要求的抗體制備方法。

后一個要求-可行性要求：制備抗體前必須要擁有制備流程所必須的平臺設(shè)備以及專業(yè)人員，如果實(shí)驗(yàn)室以前沒有涉及這塊并且以后也不打算建設(shè)此類平臺，本著“專業(yè)人做專業(yè)事成本”的原則，抗體制備的整個流程或者部分環(huán)節(jié)還是委托給專業(yè)公司。