定制多肽、磷酸肽、生物素標(biāo)記肽、熒光標(biāo)記肽、同位素標(biāo)記肽、人工胰島素、藥物肽、多肽合成、目錄肽、偶聯(lián)蛋白、化妝品肽、多肽文庫構(gòu)建、抗體服務(wù)、糖肽、訂書肽、RGD環(huán)肽等
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多肽的分類
多肽有生物活性多肽和人工合成多肽兩種。
1、生物活性肽
生物活性肽(Bioactive Peptides ,BAP)是對生物機(jī)體的生命活動有益或是具有生理作用的肽類化合物,是一類相對分子質(zhì)量小于6000Da , 具有多種生物學(xué)功能的多肽。生物活性肽具有多種人體代謝和生理調(diào)節(jié)功能,易消化吸收,有促進(jìn)免疫、激素調(diào)節(jié)、抗菌、抗病毒、降血壓、降血脂等作用,是當(dāng)前食品界 的研究課題和 發(fā)展前景的功能因子。
2、人工合成多肽
固相多肽合成方法(SPPS),由于其合成方便,迅速,成為多肽合成的 方法,而且?guī)砹硕嚯挠袡C(jī)合成上的一次革命,并成為了一支獨立的學(xué)科——固相有機(jī)合成,固相合成的發(fā)明同時促進(jìn)了肽合成的自動化。世界上 臺真正意義上的多肽合成儀出現(xiàn)在1980年代初期。
基于將單個N-α保護(hù)氨基酸反復(fù)加到生長的氨基成份上,合成一步步地進(jìn)行, 通常從合成鏈的C端氨基酸開始,接著的單個氨基酸的連接通過用DCC,混合炭酐, 或N-carboxy酐方法實現(xiàn)。Carbodiimide方法包括用DCC做連接劑連接N-和C-保護(hù)氨基酸。重要的是, 這種連接試劑促接N保護(hù)氨基酸自己炭基和C保護(hù)氨基酸自由氨基間的縮水,形成肽鏈, 同時產(chǎn)出N,N?/FONT>-dyaylcohercylurea副產(chǎn)物。
多肽合成方法
1、酸酐法
在多肽合成中,初考慮應(yīng)用酸酐要追溯到1881年Theodor Curtius對苯甲?;被宜岷铣傻脑缙谘芯俊陌被宜徙y與苯甲酰氯的反應(yīng)中,除獲得苯甲酰氨基乙酸外,還得到了BZ-Glyn-OH(n=2-6)。早期曾認(rèn)為,當(dāng)用苯甲酰氯處理時,N-苯甲?;被峄騈-苯甲酰基肽與苯甲酸形成了活性中間體不對稱酸酐。 大約在70年后,Theodor Wieland利用這些發(fā)現(xiàn)將混合酸酐法用于現(xiàn)代多肽合成。
目前,除該方法外,對稱酸酐以及由氨基酸的羧基和氨基甲酸在分子內(nèi)形成的N-羧基內(nèi)酸酐(NCA,Leuchs anhydrides)也用肽縮合。后應(yīng)該提到,不對稱酸酐常常參與生化反應(yīng)中的?;磻?yīng)。
2、混合酸酐法
有機(jī)羧酸和無機(jī)酸皆可用于混合酸酐的形成。然而,僅有幾個得到了廣泛的實際應(yīng)用,多數(shù)情況下,采用氯甲酸烷基酯。過去頻繁使用的 ,目前主要被氯甲酸異丁酯所替代。
由羧基組分和氯甲酸酯起始形成的混合酸酐,其氨解反應(yīng)的區(qū)域選擇性依賴依賴于兩個互相競爭的羰基的親電性和(或)空間位阻。在由N保護(hù)的氨基酸羧酸鹽(羧基組分)和氯甲酸烷基酯(活化組分,例如源于氯甲酸烷基酯)形成混合酸酐時,親核試劑胺主要進(jìn)攻氨基酸組分的羧基,形成預(yù)期的肽衍生物,并且釋放出游離酸形式的活性成分。
3、?;B氮物法
?;B氮物法早在1902年就被引入到肽化學(xué)中,因此它是古老的縮合方法之一。在堿性水溶液中,除了與?;B氨縮合的游離氨基酸和肽以外,氨基酸酯可用于有機(jī)溶劑中。與其他許多縮合方法不同的是,它不需要增加輔助堿或另一等當(dāng)量的氨基組分來捕獲腙酸。
*以來,一直認(rèn)為疊氮物法是 不發(fā)生消旋的縮合方法,隨著可選擇性裂解的氨基酸保護(hù)基引入,該方法經(jīng)歷了一次大規(guī)模的復(fù)興。該方法的起始原料分別是晶體狀的氨基酸酰肼或肽酰肼64,通過肼解相應(yīng)的酯很容易得到。
4、對稱酸酐法
Nα-?;被岬膶ΨQ酸酐是用于肽鍵形成的高活性中間體。與混合酸酐法多肽合成相反,它與胺親核試劑的反應(yīng)沒有模棱兩可的區(qū)域選擇性。但肽縮合產(chǎn)率 ,為50%(以羧基組分計)。
雖然由對稱酸酐氨解形成的游離Nα-酰基氨基酸可以和目標(biāo)肽一起,通過飽和碳酸氫鈉溶液萃取回收,但在初,這種方法的實用價值極低。對稱酸酐可以用Nα-保護(hù)氨基酸與光氣,或方便的碳二亞胺反應(yīng)制得。兩當(dāng)量的Nα-保護(hù)氨基酸與-當(dāng)量的碳二亞胺反應(yīng)有利于對稱酸酐的形成,對稱酸酐可以分離出來,也可不經(jīng)純化而直接用于后面的縮合反應(yīng)?;贜α-烷氧羰基氨基酸的對稱酸酐對水解穩(wěn)定,可采用類似上述純化混合酸酐的方法進(jìn)行純化。
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