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小鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒

參考價2500.00
具體成交價以合同協(xié)議為準
產(chǎn)品標簽

白介素6IL-6ELISA試劑盒

規(guī)格
48T/96T2500.00元999 件 可售

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青旗(上海)生物技術發(fā)展有限公司,總部位于上海浦東新區(qū),依托本地高校資源,逐步發(fā)展成為以生物技術為主的研發(fā)、生產(chǎn)、培訓為一體的綜合化產(chǎn)業(yè)平臺,公司在標準化細胞庫建立及細胞藥物前端模型方面成果顯著。我們秉承對用戶負責的態(tài)度,以對科研的高度嚴謹,以嚴格的質(zhì)量控制,為廣大生物醫(yī)學科研用戶提供更優(yōu)質(zhì)的服務!






感受態(tài)細胞,elisa試劑盒,質(zhì)粒

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 48T/96T
貨號 BFNE83745 應用領域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅用于科研

產(chǎn)品名稱:小鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒

 

實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠白介素6(IL-6)水平。用純化的小鼠白介素6(IL-6)捕獲抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被的微孔中依次加入小鼠白介素6(IL-6),再與HRP標記的檢測抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠白介素6(IL-6)呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠白介素6(IL-6)含量。

 注:標準品濃度依次為:120、60、30、15、7.5、0 pg/mL.

 

樣本處理及要求:
1.血清:室溫血液自然凝固 10-20 分鐘,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細收 集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。
2.血漿:應根據(jù)標本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3.尿液:用無菌管收集,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心 20 分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用 PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到 100萬/ml 左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上 進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
 
操作步驟
1.標準品的加樣:設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品 50μL;。
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl(樣品終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.加酶:每孔加入酶標試劑 100μl,空白孔除外。
4.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 60 分鐘。
5.配液:將 20 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 20 倍稀釋后備用。
6.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復 5 次,拍干。
7.顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
8.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
9.測定:以空白孔調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進行。
 
注意事項:
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。樣本在使用前也要在室溫平衡 60 分鐘。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間盡量控制在 5 分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,盡量做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本 OD 值大于標準品孔第one孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
 
 
 
計算:
以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
 
 
(此圖僅供參考)
 
試劑盒名稱:小鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒
關鍵詞:IL-6,白介素6,白細胞介素6,ELISA試劑盒
 
試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù) R 值為 0.95 以上。
2.批內(nèi)變異系數(shù)與批間變異系數(shù)應分別小于10%和15% 。
 
 
檢測范圍:
3.75 pg/mL - 120 pg/mL
 
 
靈敏度:
di檢測濃度小于 10 pg/mL
 
 
保存條件及有效期: 
1.試劑盒保存:2-8℃。
2.有效期:6個月


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