背景知識(shí)

酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測（Enzyme-Linked Immunospot Assay，ELISPOT）可以分解成“酶聯(lián)免疫"和“斑點(diǎn)"兩部分。“酶聯(lián)免疫"與ELISA中的含義相同，都是指基于酶促放大反應(yīng)的免疫學(xué)檢測。與ELISA一樣，ELISPOT的抗體也是包被于固體載體上，所不同的是：ELISA抗體捕獲的抗原來自樣品溶液中已經(jīng)存在的、均勻分布的抗原分子，而ELISAPOT抗體捕獲的抗原來自樣品細(xì)胞在檢測當(dāng)時(shí)新鮮分泌的抗原分子；ELISA顯示出來的是或深或淺的有色溶液，而ELISAPOT顯示出來的是沉積在固體基板上或多或少的有色斑點(diǎn)。

隨著酶聯(lián)免疫分析技術(shù)在醫(yī)學(xué)及生物學(xué)領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用, 使體外檢測各種細(xì)胞因子及抗體研究有了新的突破。在研究免疫應(yīng)答機(jī)制時(shí)以往常用用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測體液中游離的細(xì)胞因子（CK）或抗體，但由于游離的循環(huán)抗體或 CK 的半哀期不同，使之在體液中不斷的被代謝或與靶器官結(jié)合，而不能確切的反映體內(nèi)的抗體及CK 的水平。80 年代，國外的科研工作者根據(jù) ELISA 技術(shù)的基本原理，建立了體外檢測特異性抗體分泌細(xì)胞和 CK 分泌細(xì)胞的固相酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)（ELISPOT）。因其具有較高的特異性和敏感性，目前正被國內(nèi)外廣泛應(yīng)用，對(duì)探索自身免疫系統(tǒng)疾病發(fā)病機(jī)制具有重要意義。

應(yīng)用范圍：

德國BIOSYS公司產(chǎn)品，該EliSpot Reader是針對(duì)35-100mm培養(yǎng)碟、載片、6-384孔多孔板和微量培養(yǎng)板的自動(dòng)檢測和分析儀器。適用于目前實(shí)驗(yàn)室常用的各種培養(yǎng)板上酶聯(lián)斑點(diǎn)(Elispot)、病毒斑（ Viral Plaque）、克隆形成（CFU）、腫瘤細(xì)胞集落形成（HTCFA）,干細(xì)胞集落形成試驗(yàn)等實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析。

Elispot，SARS COV2測定，抗病毒，藥物，氟蟲，細(xì)胞/活/死/凋亡細(xì)胞，轉(zhuǎn)染，MCMV和HCMV測定，HEK 293測定，FOCI測定，中和測定，馬立克氏病病毒，類器官，轉(zhuǎn)基因測定，菌落的細(xì)胞感染測定 計(jì)數(shù)，抗生素效力，腺病毒。

For Elispot, SARS COV2 Assay, cell infection assay antiviral, drug, flourospot, live/dead/apoptotic cell, transfection, MCMV and HCMV assay, HEK 293 assay, FOCI assay, neutralisation assay, Marek's disease virus, organoids, transgene assay, colony counting, antibiotic potency, adenovirus

德國biosys公司介紹

德國biosys由化學(xué)家兼工程師Werner Freber創(chuàng)建于1986年，專注于 EliSpot酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)計(jì)數(shù)和定量自動(dòng)化檢測分析設(shè)備30多年，biosys公司的立體3D雙光照明（增強(qiáng)斑點(diǎn)與背景的對(duì)比度，有效抑制板孔側(cè)壁反光造成的“幻影現(xiàn)象”，提高檢測度），能進(jìn)行單斑點(diǎn)、每孔光密度測定以定量細(xì)胞因子分泌的照明系統(tǒng)，解決了ELISPOT斑點(diǎn)計(jì)數(shù)的快速化，標(biāo)準(zhǔn)化和斑點(diǎn)信息的詳細(xì)化，并且可以對(duì)細(xì)胞因子進(jìn)行定量分析，是能進(jìn)行單斑點(diǎn)、每孔光密度測定以定量細(xì)胞因子分泌的照明系統(tǒng)，獲得應(yīng)用于ELISPOT斑點(diǎn)識(shí)別的3D雙光源技術(shù)，*實(shí)現(xiàn)對(duì)ELISPOT膜板和ELISPOT透明板的良好識(shí)別，采用改進(jìn)機(jī)械結(jié)構(gòu)的前置式載物臺(tái)和自動(dòng)開關(guān)密閉檢測室，同一孔中同時(shí)識(shí)別多至12色ELISPOT斑點(diǎn)，*實(shí)現(xiàn)熒光ELISPOT檢測，歐盟科技項(xiàng)目：Eureka Project 2956（多種細(xì)胞因子分析儀）儀器。

biosys的bioreader（bioreader 7000系列）和 biocount（biocount6000系列）已成為Elispot酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測分析的金標(biāo)準(zhǔn)。

ELISPOT技術(shù)解決方案提供商。biosys 的產(chǎn)品包括 ELISPOT 分析儀硬件、分析軟件、試劑和標(biāo)準(zhǔn)樣等。CTL擁有自己的，符合GLP規(guī)范的高通量ELISPOT實(shí)驗(yàn)室，是世界上能提供全套 ELISPOT 服務(wù)，包括 ELISPOT 的質(zhì)量控制、標(biāo)準(zhǔn)化、臨床應(yīng)用和技術(shù)服務(wù)、E L I S P O T技術(shù)培訓(xùn)和承擔(dān)來自N I H和F D A等部門重大基金的綜合性技術(shù)服務(wù)提供商。

Biosys酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)圖像計(jì)數(shù)和分析產(chǎn)品特點(diǎn)：

●立體3D雙光照明系統(tǒng)：

能進(jìn)行單斑點(diǎn)、每孔光密度測定以定量細(xì)胞因子分泌的照明系統(tǒng)。
● 彩色成像及分析系統(tǒng)：

高分辨率2340×2000 分辨率SONY fire wire真彩數(shù)碼成像系統(tǒng)，可進(jìn)行雙色或三色Elispot實(shí)驗(yàn)結(jié)果的檢測。也適用于病毒斑(Viral Plaque)、克隆形成(CFU)、腫瘤細(xì)胞集落形成（HTCFA）,干細(xì)胞集落形成試驗(yàn)等。  數(shù)據(jù)量高達(dá)5M 的圖像數(shù)據(jù)（單孔）﹑雙色以上的圖像分析功能, 一體化HP 20’ 液晶顯示器.
● 高精度X－Y定位載板臺(tái)：

采用高精度齒輪步進(jìn)電機(jī)，避免了皮帶輪步進(jìn)電機(jī)的打滑和老化，定位精度<0.01mm。

  高精度微步進(jìn)電機(jī)、齒輪傳動(dòng)方式、樣品架移動(dòng)精度< 0.01mm
● 通用性強(qiáng)：

適用各種載玻片、35-100mm培養(yǎng)碟、6 / 12 / 24 / 48 / 96/384孔各型培養(yǎng)板和滴定板。對(duì)于實(shí)驗(yàn)室常用的U-Cytech公司、 Mabtech公司、 R&D公司、 Diaclone公司、 Millipore公司、Whatman公司、 Nunc公司等各型實(shí)驗(yàn)室常用ELISPOT KIT（透明板、白色板、PVDF和尼龍膜板）、Greiner等公司的透明培養(yǎng)板、不透明（白色）培養(yǎng)板、以及PVDF膜培養(yǎng)板均適用，檢測Elispot斑點(diǎn)同時(shí)可以分析腫瘤細(xì)胞的集落、克隆斑、病毒斑的識(shí)別。
您可以從任何來源和細(xì)胞系（無論是人還是動(dòng)物）中選擇Elispot分析。

● 自動(dòng)聚焦：

需進(jìn)行不同類型培養(yǎng)板的檢測時(shí)，無須手動(dòng)調(diào)焦，轉(zhuǎn)換更為方便。
●高靈敏性，高特異性的優(yōu)點(diǎn)：

動(dòng)態(tài)“像素周圍識(shí)別”，模糊、彌散、過大、過小斑點(diǎn)以及高背景或不規(guī)則背景均可檢測。

“自動(dòng)邊緣識(shí)別技術(shù)”,“動(dòng)態(tài)背景識(shí)別” Bioreader不是采用一個(gè)固定的背景平均“洗去”值，對(duì)不規(guī)則背景有很大意義。
Bioreader自動(dòng)識(shí)別和去除纖維, 還可以調(diào)節(jié)圖像參數(shù), 不同程度“洗去”背景，讓背景和斑點(diǎn)顏色對(duì)比。
●高分辨率：

每孔可檢測多至2000個(gè)斑點(diǎn)，直徑>3µm 的斑點(diǎn)即可被有效檢測（通常設(shè)定檢測的斑點(diǎn)大小為20-50µm）。

所有Bioreader型號(hào)均配備5 MPixel相機(jī)，Bioreader-F-z-i可使用集成的顯微變焦鏡頭提供多達(dá)200倍的放大倍率。如果用戶需要更多印版格式并正在尋找便宜的變焦效果，則可選更多像素的相機(jī)，可以升級(jí)光學(xué)組件和攝像頭
●邊沿識(shí)別系統(tǒng)：

尤其針對(duì)透明板、白色PVDF板，可有效識(shí)別板孔邊緣，保證整個(gè)板孔的計(jì)數(shù)。
●光密度值測定：

應(yīng)用ELISA透光測量原理，可對(duì)每個(gè)斑點(diǎn)，每個(gè)孔進(jìn)行光密度值測定，定量分析細(xì)胞因子分泌。
●*的WASH OUT背景補(bǔ)償功能：

對(duì)于背景重的培養(yǎng)板孔可進(jìn)行自動(dòng)背景補(bǔ)償調(diào)節(jié)。
●測量結(jié)果可信：

已經(jīng)過MABTECH, U-Cytech, Diaclone, Pharmingen, R&D等公司ELISPOT產(chǎn)品的驗(yàn)證，測量結(jié)果可信度高。
●用戶自定義參數(shù)和再分析：

用戶可根據(jù)試驗(yàn)情況設(shè)置斑點(diǎn)識(shí)別參數(shù)，直接重新分析已掃描數(shù)據(jù)，不必重復(fù)掃描。相同參數(shù)下分析結(jié)果可重復(fù)性為+/-*。
●“One－Click”測量區(qū)域選擇：

直觀的板孔選擇界面，可輕松進(jìn)行單孔、任意孔區(qū)域、全板掃描。
●智控分析方式：

用戶可手動(dòng)選擇需去除的斑點(diǎn)，自定義需去除的破損區(qū)域或無法識(shí)別區(qū)域，測量結(jié)果更可信。
●數(shù)據(jù)分析全面：

包括培養(yǎng)孔原始數(shù)據(jù)如每孔斑點(diǎn)數(shù)、斑點(diǎn)幾何形狀（直徑、圓度、曲率、毛糙度）參數(shù)、每個(gè)斑點(diǎn)坐標(biāo)、光密度（提示細(xì)胞因子量）等以及樣本均數(shù)、方差、統(tǒng)計(jì)學(xué)分布等多種統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)和分析圖表。
●直接輸出模式：

可將整板圖像，單孔圖像，每孔斑點(diǎn)數(shù)，斑點(diǎn)詳細(xì)數(shù)據(jù)、分布、和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果直接輸出到Word、Excel、Powerpoint?？蛇x擇HTML, BMP, JPEG, PDF等多種格式。
●檢測快速：超高精度掃描每個(gè)培養(yǎng)板約需12-15分鐘；快速掃描每個(gè)培養(yǎng)板約需6-8分鐘 。
● 歐盟CE認(rèn)證、符合21 CFR PART 11認(rèn)證要求

●軟件方面
預(yù)設(shè)試驗(yàn)分析模式、方便使用；分析參數(shù)開放、人機(jī)互動(dòng)更可靠
Bioreader預(yù)先設(shè)置30多種針對(duì)各種板型的分析方法，分析參數(shù)開放，用戶還可自定義分析方法，人機(jī)互動(dòng)可分析各種不同情況的Elispot實(shí)驗(yàn)板結(jié)果。

●歷史悠久，產(chǎn)品成熟度高、文獻(xiàn)量大：

30多年歷史驗(yàn)證，1500多個(gè)實(shí)驗(yàn)室成功使用，國內(nèi)有50多的單位成功使用，無技術(shù)和應(yīng)用風(fēng)險(xiǎn)。

相機(jī)和光學(xué)分辨率

在多孔板上，Bioreader®7000 Fzi micro的大分辨率是多少？

單細(xì)胞> 3 µ，聚焦點(diǎn)10-2000 µ或噬菌斑100-5000 µ，細(xì)胞克隆50-2000 µ或更多。

BIOSYS使用“真實(shí)”光學(xué)放大倍數(shù)來實(shí)現(xiàn)此分辨率

 德國Biosys酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)圖像計(jì)數(shù) 總代理

德國Biosys酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)圖像計(jì)數(shù) 總代理

Bioreader5000的性能及特點(diǎn)簡介

熒光Elispot
Bioreader 5000系列可以檢測熒光Elispot斑點(diǎn)
Biorader 5000是Elipsot領(lǐng)域商業(yè)化能檢測熒光Elipsot斑點(diǎn)的儀器.
這也是Elipsot領(lǐng)域同時(shí)檢測3種以上細(xì)胞因子的新的應(yīng)用儀器

圖像處理方面 五大*圖像技術(shù)，分辨率更高、斑點(diǎn)圖像更清晰、結(jié)果

產(chǎn)品特點(diǎn)：

l       專業(yè)的外觀設(shè)計(jì)

l       一體化HP 20’ 液晶顯示器

l       3D立體圖像照明系統(tǒng)

l       前置載物臺(tái)、密閉式檢測室

l       真彩2340×2000 分辨率的索尼公司火線（Firewire）數(shù)碼攝像系統(tǒng)

l       數(shù)據(jù)量高達(dá)5M 的圖像數(shù)據(jù)（單孔）﹑雙色以上的圖像分析功能

l       高精度微步進(jìn)電機(jī)、齒輪傳動(dòng)方式、樣品架移動(dòng)精度< 0.01mm

l       五大*圖像技術(shù)，分辨率更高、斑點(diǎn)圖像更清晰、結(jié)果

l       預(yù)設(shè)試驗(yàn)分析模式、方便使用；分析參數(shù)開放、人機(jī)互動(dòng)更可靠

l       快速檢測：2-3 分鐘完成96孔板的檢測

l       簡潔的軟件操作界面，規(guī)范的文件管理

l       適用6/12/24/96 孔任何品牌/類型的微孔板

l       適用ELISPOT/病毒斑/腫瘤細(xì)胞的集落/單克隆抗體的細(xì)胞克隆

l       軟件設(shè)計(jì)符合美國FDA 21 CFR PART 11

l       符合歐盟CE 標(biāo)準(zhǔn)

l       歐盟科技項(xiàng)目：Eureka Project 2956 (多種細(xì)胞因子分析儀)