ELISPOT酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)使用

淋巴細(xì)胞受到抗原刺激后局部產(chǎn)生細(xì)胞因子，此細(xì)胞因子被ELISPOT板底PVDF膜上(預(yù)包被的)的特異性單抗捕獲。去除細(xì)胞后，被捕獲的細(xì)胞因子與Biotin標(biāo)記的單抗結(jié)合，其后再與堿性磷酸酶或辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素結(jié)合。加底物顯色后，PVDF膜上出現(xiàn)紫色或紅褐色的斑點(diǎn)表明細(xì)胞產(chǎn)生了細(xì)胞因子，通過酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)分析儀（ELISPOT Reader）對斑點(diǎn)的進(jìn)行自動(dòng)計(jì)數(shù)和分析。

德國biosys由化學(xué)家兼工程師Werner Freber創(chuàng)建于1986年，專注于 EliSpot酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)計(jì)數(shù)和定量自動(dòng)化檢測分析設(shè)備30多年，biosys公司的立體3D雙光照明（增強(qiáng)斑點(diǎn)與背景的對比度，有效抑制板孔側(cè)壁反光造成的“幻影現(xiàn)象”，提高檢測度），能進(jìn)行單斑點(diǎn)、每孔光密度測定以定量細(xì)胞因子分泌的照明系統(tǒng)，解決了ELISPOT斑點(diǎn)計(jì)數(shù)的快速化，標(biāo)準(zhǔn)化和斑點(diǎn)信息的詳細(xì)化，并且可以對細(xì)胞因子進(jìn)行定量分析，是能進(jìn)行單斑點(diǎn)、每孔光密度測定以定量細(xì)胞因子分泌的照明系統(tǒng)，獲得應(yīng)用于ELISPOT斑點(diǎn)識(shí)別的3D雙光源技術(shù)，實(shí)現(xiàn)對ELISPOT膜板和ELISPOT透明板的良好識(shí)別，個(gè)采用改進(jìn)機(jī)械結(jié)構(gòu)的前置式載物臺(tái)和自動(dòng)開關(guān)密閉檢測室，同一孔中同時(shí)識(shí)別多至12色ELISPOT斑點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)熒光ELISPOT檢測，歐盟科技項(xiàng)目,產(chǎn)品成熟，30年歷史，1000多家實(shí)驗(yàn)室使用，國內(nèi)近百家單位使用，已成為熒光/Elispot酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測分析的金標(biāo)準(zhǔn)。

世聯(lián)博研北京科技有限公司是德國BIO-SYS包含bioreader酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)分析儀和biocount病毒菌落計(jì)數(shù)儀在內(nèi)全系列產(chǎn)品在中國大陸、香港、澳門、中國臺(tái)灣區(qū)域總授權(quán)代理商，為廣大科研用戶提供BIO-SYS全系列產(chǎn)品提供售前、售中和售后服務(wù)

Biosys酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)圖像計(jì)數(shù)和分析產(chǎn)品特點(diǎn)：

●立體3D雙光照明系統(tǒng)：

增強(qiáng)斑點(diǎn)與背景的對比度，有效抑制板孔側(cè)壁反光造成的“幻影現(xiàn)象”，提高檢測度。能進(jìn)行單斑點(diǎn)、每孔光密度測定以定量細(xì)胞因子分泌的照明系統(tǒng)。
● 彩色成像及分析系統(tǒng)：

高分辨率2340×2000 分辨率SONY fire wire真彩數(shù)碼成像系統(tǒng)，可進(jìn)行雙色或三色Elispot實(shí)驗(yàn)結(jié)果的檢測。也適用于病毒斑(Viral Plaque)、克隆形成(CFU)、腫瘤細(xì)胞集落形成（HTCFA）,干細(xì)胞集落形成試驗(yàn)等。  數(shù)據(jù)量高達(dá)5M 的圖像數(shù)據(jù)（單孔）﹑雙色以上的圖像分析功能, 一體化HP 20’ 液晶顯示器.
● 高精度X－Y定位載板臺(tái)：

采用高精度齒輪步進(jìn)電機(jī)，避免了皮帶輪步進(jìn)電機(jī)的打滑和老化，定位精度<0.01mm。

高精度微步進(jìn)電機(jī)、齒輪傳動(dòng)方式、樣品架移動(dòng)精度< 0.01mm
● 通用性強(qiáng)：

適用各種載玻片、35-100mm培養(yǎng)碟、6 / 12 / 24 / 48 / 96/384孔各型培養(yǎng)板。對于實(shí)驗(yàn)室常用的U-Cytech、MILLIPORE、NUNC、 Whatman、Greiner等公司的透明培養(yǎng)板、不透明（白色）培養(yǎng)板、以及PVDF膜培養(yǎng)板均適用。
● 自動(dòng)聚焦：

需進(jìn)行不同類型培養(yǎng)板的檢測時(shí)，無須手動(dòng)調(diào)焦，轉(zhuǎn)換更為方便。
●高靈敏性，高特異性的優(yōu)點(diǎn)：

動(dòng)態(tài)“像素周圍識(shí)別”，模糊、彌散、過大、過小斑點(diǎn)以及高背景或不規(guī)則背景均可檢測。
●高分辨率：

每孔可檢測多至2000個(gè)斑點(diǎn)，直徑>3m 的斑點(diǎn)即可被有效檢測（通常設(shè)定檢測的斑點(diǎn)大小為20-50m）。
●邊沿識(shí)別系統(tǒng)：

尤其針對透明板、白色PVDF板，可有效識(shí)別板孔邊緣，保證整個(gè)板孔的計(jì)數(shù)。
●光密度值測定：

應(yīng)用ELISA透光測量原理，可對每個(gè)斑點(diǎn)，每個(gè)孔進(jìn)行光密度值測定，定量分析細(xì)胞因子分泌。
●*的WASHOUT背景補(bǔ)償功能：

對于背景重的培養(yǎng)板孔可進(jìn)行自動(dòng)背景補(bǔ)償調(diào)節(jié)。
●測量結(jié)果可信：

已經(jīng)過MABTECH, U-Cytech, Diaclone, Pharmingen, R&D等公司ELISPOT產(chǎn)品的驗(yàn)證，測量結(jié)果可信度高。
●用戶自定義參數(shù)和再分析：

用戶可根據(jù)試驗(yàn)情況設(shè)置斑點(diǎn)識(shí)別參數(shù)，直接重新分析已掃描數(shù)據(jù)，不必重復(fù)掃描。相同參數(shù)下分析結(jié)果可重復(fù)性為+/-*。
●“One－Click”測量區(qū)域選擇：

直觀的板孔選擇界面，可輕松進(jìn)行單孔、任意孔區(qū)域、全板掃描。
●智控分析方式：

用戶可手動(dòng)選擇需去除的斑點(diǎn)，自定義需去除的破損區(qū)域或無法識(shí)別區(qū)域，測量結(jié)果更可信。
●數(shù)據(jù)分析全面：

包括培養(yǎng)孔原始數(shù)據(jù)如每孔斑點(diǎn)數(shù)、斑點(diǎn)幾何形狀（直徑、圓度、曲率、毛糙度）參數(shù)、每個(gè)斑點(diǎn)坐標(biāo)、光密度（提示細(xì)胞因子量）等以及樣本均數(shù)、方差、統(tǒng)計(jì)學(xué)分布等多種統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)和分析圖表。
●直接輸出模式：

可將整板圖像，單孔圖像，每孔斑點(diǎn)數(shù)，斑點(diǎn)詳細(xì)數(shù)據(jù)、分布、和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果直接輸出到Word、Excel、Powerpoint?？蛇x擇HTML,BMP, JPEG, PDF等多種格式。
●檢測快速：超高精度掃描每個(gè)培養(yǎng)板約需12-15分鐘；快速掃描每個(gè)培養(yǎng)板約需6-8分鐘 。
● 歐盟CE認(rèn)證、符合21 CFR PART 11認(rèn)證要求

●歷史悠久，產(chǎn)品成熟度高、文獻(xiàn)量大：

30多年歷史驗(yàn)證，1500多個(gè)實(shí)驗(yàn)室成功使用，國內(nèi)有50多的單位成功使用，無技術(shù)和應(yīng)用風(fēng)險(xiǎn)。

應(yīng)用范圍：

單細(xì)胞解析度/體外抗原特異性T細(xì)胞頻率的準(zhǔn)確測量，細(xì)胞因子協(xié)同表達(dá)/雙色ELISPOT，腫瘤免疫，T細(xì)胞功能研究，移植免疫等；對探索免疫系統(tǒng)疾病的發(fā)病機(jī)制和腫瘤免疫細(xì)胞治療評價(jià)具有重要意義。

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