重組腸激酶Enterokinase生物化學(xué)

重組腸激酶Enterokinase生物化學(xué)

酶切條件：

按照酶活性定義，重組EK酶切條件舉例：25mM Tris-HCl 8.0體系中：

融合蛋白濃度  0.1-1mg/ml （蛋白總量50-100µg）

重組EK用量   1-2U

溫度          25℃

過夜酶切，或*酶切需12h-16h。

常見影響腸激酶活性的因素

在＞200mM 咪唑，或＞200mMNaCl，或＞5%甘油，酶切效果受影響?？蓞⒄找韵峦扑]方法進(jìn)行酶切：

1）為獲得理想酶切結(jié)果，請將樣品透析到25mM Tris-HCl 8.0緩沖液中，再進(jìn)行酶切。

2）若不便透析，可將樣品稀釋，咪唑含量在100mM以下，NaCl濃度在50mM以下，甘油濃度小于5%以下進(jìn)行酶切，酶的用量與蛋白的比例不變（即1U酶切50µg蛋白）。

3）如果樣品溶液中含有上述成分中的一種或多種，且不便去除，此時適當(dāng)增加酶量或延長酶切時間，也可達(dá)到較好酶切效果。

該酶經(jīng)HPLC純化，純度高，特異性高，并且不含其他蛋白酶。腸激酶（EC 3.4.21.9）是一個特定的蛋白酶，它可以切割前面含有四個天冬氨酸的賴氨酸羧基端位點(diǎn)：天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 賴氨酸。腸激酶可去除位于蛋白質(zhì)N-末端的融合蛋白，以除去不需要的融合標(biāo)簽。

產(chǎn)品用途
用于去除位于蛋白質(zhì)N-末端的融合蛋白，以除去不需要的融合標(biāo)簽。

活性：

≥10U/ul

≥50U/ul