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化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>試劑標(biāo)物>常用實驗試劑>普通試劑> 大鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1試劑盒

大鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1試劑盒

具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

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上海奧陸生物科技有限公司主營:傳代細(xì)胞株,原代細(xì)胞,耐藥細(xì)胞,示蹤細(xì)胞,菌種,抗體,試劑盒,儀器。供應(yīng)國內(nèi)/外各類細(xì)胞(ATCC,sciencell、ICLC) 菌種(標(biāo)準(zhǔn)菌株,成品菌粉),ELISA試劑盒(可提供實驗室免費待測),PCR試劑盒(食品安全檢測 生植檢測 臨床檢測 動物安全檢測 ),抗體( Biolegend,Bethyl,ADI,Ancell,Oxis,NanoBac) ,公司實驗室熱門供應(yīng):傳代細(xì)胞,原代細(xì)胞,耐藥株,熒光細(xì)胞株,細(xì)胞染色,免疫組化,ELISA試劑盒,酶標(biāo)儀洗板機(jī)等。

ATCC傳代細(xì)胞,示蹤細(xì)胞,耐藥細(xì)胞,胎牛血清,培養(yǎng)基,試劑,耗材

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 96T
應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè) 主要用途 科研

檢測范圍:  96T

10μg/L -400μg/L

使用目的:

大鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1試劑盒 用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1 (TSP-1)含量。

實驗原理

大鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1試劑盒 應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1 (TSP-1)水平。用純化的大鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1 (TSP-1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1 (TSP-1),再與HRP標(biāo)記的血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1 (TSP-1)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1 (TSP-1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1 (TSP-1)濃度。

試劑盒組成

1

30倍濃縮洗滌液

20ml×1瓶

7

終止液

6ml×1瓶

2

酶標(biāo)試劑

6ml×1瓶

8

標(biāo)準(zhǔn)品(640μg/L)

0.5ml×1瓶

3

酶標(biāo)包被板

12孔×8條

9

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1.5ml×1瓶

4

樣品稀釋液

6ml×1瓶

10

說明書

1份

5

顯色劑A液

6ml×1瓶

11

封板膜

2張  

6

顯色劑B液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1個

標(biāo)本要求 

1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟

  • 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

320μg/L

5號標(biāo)準(zhǔn)品

150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

160μg/L

4號標(biāo)準(zhǔn)品

150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

80μg/L

3號標(biāo)準(zhǔn)品

150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

40μg/L

2號標(biāo)準(zhǔn)品

150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

20μg/L

1號標(biāo)準(zhǔn)品

150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

 

 

  • 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
  • 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
  • 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
  • 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
  • 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
  • 溫育:操作同3。
  • 洗滌:操作同5。
  • 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
  • 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行



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