l 細(xì)胞鑒定

STR鑒定已通過

l 細(xì)胞來源

國(guó)家資源庫

l 細(xì)胞背景

這株淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞株1980 年，源自一位30歲白人男性，患有惡性紅細(xì)胞白血病，能夠自然產(chǎn)生并能誘導(dǎo)球蛋白合成。 細(xì)胞的EB病毒核抗原陰性，沒有表面免疫球蛋白與細(xì)胞質(zhì)免疫球蛋白。 HEL細(xì)胞表達(dá)HLA抗原(HLA-A3, AW32, BW35), β-2 小球蛋白，一定比例的細(xì)胞還表達(dá)Ia抗原。 這個(gè)細(xì)胞株提供了一種用于研究紅細(xì)胞分化和球蛋白基因表達(dá)的模型。 它類似于小鼠中的血友病。

要引用此細(xì)胞系，請(qǐng)使用：HEL (RRID:CVCL_0001)

l 細(xì)胞特性

1） 來源：人外周血

2） 形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣，懸浮生長(zhǎng)

3） 含量：>1x106 細(xì)胞數(shù)

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途：僅供科研使用。

l 培養(yǎng)條件：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640（推薦awcell-0002）培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；雙抗1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

l 注意事項(xiàng)：

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

懸浮狀態(tài)下生長(zhǎng)的細(xì)胞，可以通過向培養(yǎng)瓶中添加*培養(yǎng)基來維持細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)，一般情況下細(xì)胞密度維持在1×105~1×106個(gè)/mL（不同細(xì)胞對(duì)密度要求不同，）可以維持細(xì)胞的正常生長(zhǎng)。如需分瓶可以將細(xì)胞懸液收集到離心管中1000rpm，離心5min，棄去上清，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3） 細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

l 運(yùn)輸形式：

低溫：（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

常溫（2） T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

l 生物安全:

1. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2. 建議在復(fù)蘇凍存細(xì)胞時(shí)始終使用防護(hù)手套、衣服和戴上防護(hù)面罩。注意：凍存管浸沒在液氮中會(huì)泄漏，并會(huì)慢慢充滿液氮。解凍時(shí)，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險(xiǎn)力吹掉其蓋子，從而產(chǎn)生飛揚(yáng)的碎屑造成人員傷害。