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小鵝瘟病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書

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山東藍(lán)都生物科技有限公司成立于2015年,秉承“品質(zhì)至上、客戶第一、追求ZHUOYUE”的生產(chǎn)服務(wù)宗旨,“自強(qiáng)不息、艱苦奮斗、務(wù)實(shí)創(chuàng)新、追求ZHUOYUE”的精神,不忘初心,目標(biāo)堅(jiān)定,做BEST產(chǎn)品,服務(wù)于行業(yè)客戶。食品安全檢測(cè)事業(yè)部現(xiàn)有保健品類、激素及類固醇類、重金屬類、喹惡啉類、消炎鎮(zhèn)痛類、水產(chǎn)違禁類、牛羊馬類、農(nóng)藥DU品類、禽病類、生理活性物、體外診斷IVD炎癥、細(xì)菌含傳染病類等多個(gè)品種。

主要產(chǎn)品有真菌毒素免疫親和柱、真菌毒素嵌合酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒、真菌毒素膠體金定性檢測(cè)卡、量子點(diǎn)定量檢測(cè)卡、食品安全定量/定性檢測(cè)箱、食品安全抗原及單克隆抗體、單克隆及多克隆抗體制備試劑耗材及相關(guān)儀器、食品安全與動(dòng)物疫病類抗原及單克隆抗體等約1200種,部分產(chǎn)品已經(jīng)出口到德國(guó)、俄羅斯、伊朗、英國(guó)、美國(guó)等多個(gè)國(guó)家。

地址:山東省濱州市國(guó)家經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)黃河二路376號(hào) 

郵編:256600  


疫苗、獸藥,食品安全檢測(cè)抗原抗體試劑盒 、親和柱、檢測(cè)卡、生產(chǎn)原材料,動(dòng)物疫病檢測(cè)抗原抗體檢測(cè)卡試劑盒

供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)

小鵝瘟病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書

【用途】 用于小鵝瘟病毒核酸的檢測(cè)。

試劑

編號(hào)

20T

50T

保存

裂解液

4mL

10mL

室溫

A

無水乙醇

4mL

10mL

室溫

去蛋白漂洗液

12mL

28mL

室溫

洗滌液

32mL

77mL

室溫

洗脫液

2mL

5mL

室溫

蛋白酶K

0.2mL

0.5mL

-20

B

PCR反應(yīng)液

200μL

500μL

-20

引物

40μL

100μL

-20

陽性對(duì)照

30μL

30μL

-20

陰性對(duì)照

300μL

300μL

-20

DL2000 DNA Marker

20μL

50μL

-20

小鵝瘟病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書操作步驟】

1.樣本前處理及核酸提取  

樣本前處理

取適量病料心、肝、腸等組織,于滅菌研缽充分研磨,用PBS按照13體積稀釋成均勻乳劑,經(jīng)10 000rpm離心3 min

核酸提?。?/span>

(1)取200μL上述樣本離心后上清液和10μL蛋白酶K加入一只新的1.5mL離心管,然后加入200μL裂解液,劇烈振蕩。(蛋白酶K開蓋使用后建議存于2-8)混勻5~10秒。

(2)56℃溫浴10分鐘。

(3)在上述離心管中加入200μL無水乙醇,充分振蕩混勻510秒。

(4)將步驟3中混勻的液體轉(zhuǎn)移至一只套有收集管的純化柱上,10 000rpm離心1分鐘,棄去套管內(nèi)液體。

(5)將500μL去蛋白漂洗液加入純化柱上,10 000rpm離心1分鐘,并棄去套管內(nèi)液體。

(6)將700μL洗滌液加入純化柱上,10 000rpm離心1分鐘,并棄去套管內(nèi)液體。

(7)可選:重復(fù)步驟(6)。

(8)再將純化柱放回接液管上,13 000rpm離心1分鐘。

(9)將純化柱移到一只干凈的1.5mL離心管中。

(10)向離心柱內(nèi)加50μL洗脫液,室溫靜置1分鐘后12 000rpm離心1分鐘,棄純化柱,離心管內(nèi)液體中含有基因組DNA。提純的基因組DNA如果不立即使用,請(qǐng)保存于-20℃。

2. PCR加樣體系(總體系20 μL將下列試劑加入PCR反應(yīng)管中。

PCR反應(yīng)液

引物

10μL

2.0μL

模   板

8μL

(注:陰、陽性對(duì)照設(shè)立,由試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品直接替換“模板”即可。)

3. 反應(yīng)程序

           94預(yù)變性

 5min

           94變性

 30s

           51退火

 30s   34個(gè)循環(huán)

           72延伸

 30s  

           72延伸             6min

           4

5min

4.

配制1%瓊脂糖凝膠,取PCR產(chǎn)物5uL,加樣于凝膠孔中,同時(shí)在相鄰孔加3μl DL2000 DNA Marker,在120v-130v 電壓下,1×TAE液中電泳15-20min,在紫外成像儀下觀察結(jié)果。

【結(jié)果判定】

   372b左右位置出現(xiàn)擴(kuò)增帶,核酸檢測(cè)為陽性(如圖)。

   372b左右位置未出現(xiàn)擴(kuò)增帶,核酸檢測(cè)為陰性                        

                         


1.B使用之前請(qǐng)*溶解并離心數(shù)秒后使用,蛋白酶K開蓋使用后建議保存于2-8℃。

2 反復(fù)凍融試劑將降低檢測(cè)靈敏度,盡量減少反復(fù)凍融

3 為避免樣本間的交叉污染,模板最后加,加模板時(shí)先加陰性對(duì)照,再加檢測(cè)樣品,最后加陽性對(duì)照,有條件的實(shí)驗(yàn)室加模板的移液器應(yīng)與加其它組份的移液器分開。

4 上機(jī)前注意檢查確保反應(yīng)混合液內(nèi)無氣泡,且反應(yīng)管蓋緊。

【生產(chǎn)企業(yè)】  

企業(yè)名稱:山東綠都生物科技有限公司

生產(chǎn)地址:山東省濱州市經(jīng)濟(jì)開發(fā)區(qū)黃河二路169號(hào)綠都生物工程高科技園

【有效期】本制品有效期為1年,生產(chǎn)日期見包裝內(nèi)側(cè)。

僅供獸醫(yī)診斷使用


長(zhǎng)期提供原核、真核蛋白表達(dá)構(gòu)建服務(wù)

長(zhǎng)期 提供抗原偶聯(lián)、 HRP、生物素、糖基化、親和素、FITC等偶聯(lián)標(biāo)記多肽、抗體、抗原、蛋白等服務(wù)




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