心血管相關(guān)原代分離
- 公司名稱 上海申知心生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產(chǎn)地 上海市寶山區(qū)高境鎮(zhèn)
- 廠商性質(zhì) 代理商
- 更新時間 2025/4/27 10:26:34
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心血管疾病動物模型,動脈粥樣硬化模型,高血脂癥動物模型,缺血性心臟病動物模型,心肌病動物模型,高血壓動物模型,肺動脈高壓動物模型,心血管模型,心血管相關(guān)原代分離
原代培養(yǎng)心肌細(xì)胞作為一種主要的體外研究模型,被廣泛應(yīng)用于心血管研究之中。常用于電生理、心肌損傷修復(fù)、心肌缺血再灌注損傷機制和藥物保護(hù)心肌的機制研究。我們經(jīng)過長期嘗試,摸索出了一些行之有效的方法,能夠獲得純度高、活性好的原代新生大鼠、小鼠心肌細(xì)胞。
分離方法:
新生大鼠或小鼠心肌細(xì)胞常用II型膠原酶消化法。例如,通過剪碎心臟組織后,用0.05% II型膠原酶預(yù)消化去除血細(xì)胞,再用0.1% II型膠原酶分階段消化(12分鐘+4分鐘),結(jié)合差速離心或Percoll密度梯度離心分離心肌細(xì)胞,存活率可達(dá)80%以上。成年心肌細(xì)胞則需優(yōu)化酶解條件,如添加布雷他?。˙lebbistatin)以抑制收縮損傷,提高活力和電生理特性。關(guān)鍵優(yōu)化:
鼠齡選擇:新生1-3日齡乳鼠心肌細(xì)胞增殖能力較強,分離后貼壁快、存活率高;成年心肌細(xì)胞需更精細(xì)的酶解流程。
培養(yǎng)基與基質(zhì):MEM培養(yǎng)基結(jié)合層粘連蛋白基質(zhì)可維持心肌細(xì)胞形態(tài)和功能。
凍存技術(shù):優(yōu)化冷凍保存液(如含DMSO和血清)可實現(xiàn)66%以上的細(xì)胞回收率,且功能損傷極小。

