抗體噬菌體展示服務(wù)
- 公司名稱 泰克生物科技（天津）有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2024/6/10 13:56:11
- 訪問次數(shù) 269
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抗體偶聯(lián)藥物發(fā)現(xiàn)服務(wù)、CAR候選分子發(fā)現(xiàn)服務(wù)以及相關(guān)的抗體測序和親和力測定服務(wù)；納米抗體文庫構(gòu)建與篩選服務(wù)，噬菌體文庫構(gòu)建和篩選服務(wù)以及抗體親和力成熟等相關(guān)服務(wù)
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
|---|---|---|---|
| 規(guī)格 | 項目 |
泰克生物致力于為客戶提供高親和力、高特異性的抗體藥物前期發(fā)現(xiàn)技術(shù)服務(wù)，為客戶的后續(xù)的CAR-T/CAR-NK先導序列設(shè)計、抗體人源化、藥物靶點抗體開發(fā)、抗體偶聯(lián)藥物（ADC）開發(fā)、雙特異性抗體開發(fā)以及高效阻斷型中和抗體開發(fā)等下游研發(fā)工作提供有力支持。泰克生物在藥物抗體發(fā)現(xiàn)方面擁有10年的項目開發(fā)經(jīng)驗和心得，能夠為客戶提供高質(zhì)量的針對包括但不限于蛋白、多肽、小分子、病毒、膜蛋白以及mRNA等靶點的駝源VHH發(fā)現(xiàn)服務(wù)以及不同物種（兔源、鼠源、羊源和駝源等）scFv發(fā)現(xiàn)服務(wù)。
噬菌體展示技術(shù)（Phage Display Technology）是將外源蛋白或多肽的DNA序列插入到噬菌體外殼蛋白結(jié)構(gòu)基因的適當位置，通常為M13噬菌體的P3蛋白，使外源基因隨外殼蛋白的表達而展示到噬菌體表面的生物技術(shù)。基于噬菌體展示技術(shù)（Phage Display Technology），泰克生物能夠為客戶提供高質(zhì)量的包括但不限于VHH、scFv等單鏈抗體噬菌體展示服務(wù)，且噬菌體文庫庫容可達10^8-10^9，文庫多樣性、插入率、陽性率均可達90%以上，滿足各類客戶對于抗體噬菌體展示文庫的質(zhì)量要求。噬菌體展示的優(yōu)勢在于其展示納米抗體文庫中變異抗體基因的多樣性，各個重組噬菌體（常用噬菌體為M13噬菌體）表面展示出不同的抗原結(jié)合域，相較于傳統(tǒng)雜交瘤方法，噬菌體展示技術(shù)在抗體基因展示與篩選層面則具有非常突出的效率優(yōu)勢（如雜交瘤融合效率一般<0.4%，即1000次融合細胞中，大概4個融合子；而噬菌體展示輕松可以獲得10^8-10^9個正確抗體序列）。同時，泰克生物還能提供抗體噬菌體展示配套的下游抗體體外驗證（包括但不限于親和力驗證、抗體阻斷驗證、交叉反應(yīng)驗證等多種下游驗證實驗）、抗體人源化、抗體親和力成熟、CAR-T/CAR-NK先導序列設(shè)計及細胞殺傷驗證等一站式技術(shù)服務(wù)，客戶只需要提供具體的實驗需求和靶點信息，泰克生物的科學家均能夠根據(jù)客戶的需求進行合理的方案設(shè)計和個性化定制，為客戶的科研項目及藥物抗體開發(fā)助力。
█ 噬菌體展示抗體文庫構(gòu)建服務(wù)
泰克生物可為客戶提供駝源VHH納米抗體庫，scFv抗體庫等文庫構(gòu)建以及篩選服務(wù)。其中VHH納米抗體庫，又稱為駝源重鏈抗體文庫，抗體分子量大小為15kDa，是駝源動物產(chǎn)生的一種抗體。目前被廣泛應(yīng)用于CAR-T/CAR-NK治療性的駝源VHH抗體。
█ 服務(wù)內(nèi)容和周期
步驟 | 服務(wù)內(nèi)容 | QC標準 | 周期 |
Step1：抗原準備 | *抗原類型： (1) 重組蛋白制備 (2) 小分子（改造）+偶聯(lián) (3) 多肽合成+偶聯(lián) (4) 客戶提供滅活病毒 (5) 客戶提供封裝好的mRNA | 抗原QC標準： 重組蛋白3-3.5mg(純度>85%)； 小分子純度>90%； 多肽純度>90%；
| 4-6周 |
Step2:動物免疫 | (1) 動物免疫4次，加強免疫一針，共計免疫5針； (2) 免疫前采集陰性血清，第4針采血進行ELISA檢測血清效價； (3) 若第4針血清抗體效價滿足要求，則采血前7天再次加強免疫1針，如不滿足要求，則繼續(xù)常規(guī)免疫； (4) 效價合格，采血分離單核細胞； | 動物：背景清晰； 免疫：蛋白/病毒抗原效價>10^5；多肽/小分子抗原效價>10^4； | 10周 |
Step3:模板cDNA制備 | (1) PBMC總RNA提取 (2) 高保真RT-PCR制備cDNA | cDNA：膠圖分布均勻； | 1 天 |
Step4:噬菌體展示文庫構(gòu)建 | (1) 以cDNA為模板，兩輪PCR法擴增VHH基因； (2) 噬粒構(gòu)建與轉(zhuǎn)化： VHH基因拼接噬菌粒載體，電擊轉(zhuǎn)化TG1宿主菌，構(gòu)建抗體庫； (3) 鑒定：隨機挑選24個克隆，PCR鑒定陽性率+插入率 (4) 輔助噬菌體準備：M13噬菌體擴增+純化； (5) VHH展示文庫救援 | 文庫陽性率：>90%； 文庫插入性率：>90%； 庫容：>10^8 | 2-3周 |
Step5:文庫篩選（3輪篩選）(固相篩選) | (1) 抗原包被（單個蛋白篩選，常規(guī)默認是固相篩選法或磁珠分選）； (2) 默認3輪篩選：壓力篩選，去除非特異性抗體； (3) 挑取單個克隆擴增噬菌體+IPTG誘導表達+ELISA檢測陽性克??； (4) 挑取全部陽性克隆進行基因測序； | ELISA陽性標準：P/N>3； VHH篩選標準：CDR氨基酸序列不同 | 2-3周 |
Step6:抗體驗證 | (1) 將獲得的抗體序列構(gòu)建合適的表達載體進行表達+親和純化+抗體蛋白定量； (2) ELISA驗證抗體與抗原結(jié)合; (3) BLI法驗證抗體親和力； (4) 細胞功能驗證：流式阻斷驗證； | 重組抗體1mg，純度90%； 快速親和力測定結(jié)果； 阻斷驗證結(jié)果； | 4-6周 |
█ 抗體噬菌體展示服務(wù)優(yōu)勢
-- 物種適應(yīng)性廣泛：人，鼠，兔，羊，羊駝，駱駝，魚等物種的單抗開發(fā)均兼容（不適用牛源單抗開發(fā)）
-- 多種駝源免疫可供選擇，包括但不限于大羊駝llama、小羊駝Alpaca以及駱駝等，且動物來源背景清晰
-- 擁有免疫基地：動物資源充足，包括但不限于駝源、鼠源、兔源以及羊源等
-- 開發(fā)周期短：獲得PBMC后，建庫到篩選獲得抗體序列4-6周
-- 多種抗體庫噬菌體展示可選：VHH抗體庫展示、scFv抗體庫展示等
-- 多種靶點抗體發(fā)現(xiàn)服務(wù)可選：蛋白、多肽、小分子、病毒、膜蛋白、mRNA等（可針對具體的項目需求設(shè)計定制化的多種類型抗原搭配的免疫方案）
-- 技術(shù)平臺成熟：庫容可達10^8-10^9，插入率均滿足>90%，篩選獲得的抗體親和力普遍處于nM- pM級別
-- 高標準交付：效價保證、文庫質(zhì)量保證、高親和力和高特異性抗體保證，為客戶的下游實驗提供有力支持
-- 實驗記錄可追溯：QC質(zhì)控標準（免疫效價、PBMC質(zhì)控、文庫質(zhì)控及篩選驗證質(zhì)控），中英文實驗報告，原始實驗記錄
-- 一對一個性化方案定制（包括免疫方案、建庫方案、篩選方案以及后續(xù)的體外表達驗證方案等），滿足各類客戶的科研項目需求
-- 文庫篩選方式多樣性：根據(jù)客戶項目需求設(shè)計篩選方式，如固相篩選、液相篩選、細胞篩選、磁珠篩選等
-- 可提供一系列配套的下游藥物抗體開發(fā)服務(wù)，抗體體外表達驗證、抗體人源化、抗體親和力成熟、雙特異性抗體開發(fā)、CAR-T先導序列分子設(shè)計、抗體偶聯(lián)藥物（ADC）開發(fā)等
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