產(chǎn)品名稱：人CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA檢測(cè)試劑盒

　　英文名稱：HumanCXC-chemokineligand16,CXCL16ElisaKit

　　規(guī)格：48T/96T

　　保存；2-8℃。

　　檢測(cè)目的：用于檢測(cè)血漿，血清及相關(guān)液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本.

　　檢測(cè)種屬：大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚(yú)、人、等動(dòng)植物。

　　人CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA檢測(cè)試劑盒試劑準(zhǔn)備：

　　1.使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。

　　2.標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管，每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度，標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

　　3.濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進(jìn)行30倍稀釋。

　　標(biāo)本的采集與保存：

　　1、血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4oC過(guò)夜，然后1000×g離心20分鐘，取上清即

　　可，或?qū)⑸锨逯糜?20oC或-80oC保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

　　2、血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8oC1000×g離心15分鐘，

　　取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?20oC或-80oC保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

　　3、組織勻漿：

　　1）取適量組織塊，于預(yù)冷PBS（0.01mol/L,pH7.0-7.2）中清洗去除血液，稱重后備用（組織塊較大需先剪碎后再勻漿）；

　　2）可同時(shí)選用多種勻漿方法達(dá)到較好的破碎效果：首先將組織塊移入玻璃勻漿器，加入5-10mL預(yù)冷PBS進(jìn)行充分研磨，該過(guò)程需在冰上進(jìn)行（有條件實(shí)驗(yàn)室可選用機(jī)器勻漿）；得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復(fù)凍融進(jìn)一步處理（超聲破碎過(guò)程中注意冰浴降溫；反復(fù)凍融法可重復(fù)2次）。

　　3）將制備好的勻漿液于5000×g離心5分鐘，留取上清即可檢測(cè)。

　　4、其它生物標(biāo)本：請(qǐng)1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?20oC或-80oC保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

　　試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被V-生育酚（v-Tocopherol）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的V-生育酚（v-Tocopherol）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。