蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：乳過氧化物酶(LPO)重組蛋白人

英文名稱：Recombinant Lactoperoxidase (LPO)

SPO; Salivary peroxidase

型號：GOY-01D174

酶與激酶

感染免疫

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：分泌, 細(xì)胞外基質(zhì)

預(yù)測分子量：37.9kDa

實(shí)際分子量：38kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Phe366~Phe572 with Two N-terminal Tags, His-tag and SUMO-tag

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：10.1

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Methionine Adenosyltransferase II Alpha (MAT2a)  產(chǎn)品名稱：蛋腺苷轉(zhuǎn)移酶Ⅱα(MAT2a)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Methionine Adenosyltransferase I Alpha (MAT1a)  產(chǎn)品名稱：蛋腺苷轉(zhuǎn)移酶Ⅰα(MAT1a)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Dopa Decarboxylase (DDC)  產(chǎn)品名稱：多巴脫羧酶(DDC)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Glycine Dehydrogenase (GLDC)  產(chǎn)品名稱：脫氫酶(GLDC)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Histidine Decarboxylase (HDC)  產(chǎn)品名稱：組脫羧酶(HDC)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Uroporphyrinogen Decarboxylase (UROD)  產(chǎn)品名稱：尿卟啉原脫羧酶(UROD)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

細(xì)胞維甲酸結(jié)合蛋白2抗體 CRABP2

胰羧肽酶B1抗體 Carboxypeptidase B1

2號染色體開放閱讀框80抗體 C2orf80

磷酸化CD32B抗體 phospho-CD32B(Tyr291)

過敏毒素C3（補(bǔ)體C3）抗體 Complement C3

癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子抗體 CD66c

細(xì)胞質(zhì)多聚腺苷酸結(jié)合蛋白1抗體 CPEB1

半抑制劑7抗體 CST7

神經(jīng)細(xì)胞表面蛋白F3 Contactin-1

組織C抗體 Cathepsin C/DPP1

22號染色體開放閱讀框29抗體 C22orf29

半胱胺酸蛋白-4抗體 Caspase 4

乳過氧化物酶(LPO)重組蛋白人NCI-H2227(人小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基百脈根根瘤菌 Rhizobium loti

發(fā)根土壤桿菌 Agrobacterium rhizogenes大鼠肺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeHuH-7人肝細(xì)胞

腎毛霉屬 Mucor sp.

宇佐美曲霉 Aspergillus usamii費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

大鼠腦成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

MV3(人黑色素瘤細(xì)胞)短小芽胞桿菌 Bacillus pumilus

根瘤菌HS 683(人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞)

小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌 Yersinia enterocolitica釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

黑曲霉 Aspergillus niger糙皮側(cè)耳 Pleurotus ostreatus

人臍動脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基褐球固氮菌 Azotobacter chrooccum