硫氧還蛋白氧化還原酶（TrxR）測(cè)試盒

分光光度法 50管/48樣

 注意：正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意義：

TrxR 是一種 NADPH 依賴的包含 FAD 結(jié)構(gòu)域的二聚體硒酶，屬于吡啶核苷酸-二硫化物氧化還原酶家族成員，與硫氧還蛋白以及 NADPH 共同構(gòu)成了硫氧還蛋白系統(tǒng)。TrxR 與 GR 活性類似，催化GSSG 還原生成GSH，是谷胱-甘肽氧化還原循環(huán)關(guān)鍵酶之一。

測(cè)定原理：

TrxR 催化 NADPH 還原 DTNB 生成 TNB 和 NADP+，TNB 在 412 nm 有特征吸收峰，通過測(cè)定 412nm 波長(zhǎng)處 TNB 的增加速率，即可計(jì)算 TrxR 活性。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、可調(diào)節(jié)移液器、1mL 玻璃比色皿和蒸餾水。

試劑組成和配制：

試劑一：液體 90mL×1 瓶，4℃保存。

試劑二：液體 5mL×1 瓶，4℃避光保存。

試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前加入 5 mL 蒸餾水溶

粗酶液提?。?/span>

1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿。8000g，4℃離心 10min，取上清置冰上待測(cè)。

2. 細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（10⁴  個(gè)）：試劑一體積（mL）為 500~1000：1  的比例（建議 500 萬細(xì)胞加入 1mL 試劑一），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7秒，總時(shí)間 3min）；然后 8000g，4℃，離心 10min，取上清置于冰上待測(cè)。

3. 血清等液體：直接測(cè)定。

硫氧還蛋白氧化還原酶（TrxR）測(cè)試盒