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人CD34+造血干/前體細(xì)胞擴(kuò)增試劑盒

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!


上海聯(lián)贏生物科技有限公司是一家實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品專業(yè)服務(wù)商,致力于為生命科學(xué)、生物技術(shù)、藥物研究、醫(yī)學(xué)診斷、醫(yī)療器械等領(lǐng)域提供專業(yè)技術(shù)服務(wù)。我們的產(chǎn)品主要包括分析儀器、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、試劑、耗材和軟件等,期待與志同道合的行業(yè)精英共同合作,技術(shù)創(chuàng)新,為中國生命科學(xué)領(lǐng)域研究者提供更好的綜合解決方案。

分析儀器、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、試劑、耗材

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1 kit
貨號 CS-20008-50 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥,綜合
產(chǎn)品介紹

人CD34+造血干/前體細(xì)胞擴(kuò)增試劑盒是為在體外培養(yǎng)和擴(kuò)增人CD34+造血干/前體細(xì)胞而專門設(shè)計(jì)的一款含血清培養(yǎng)基套裝。該試劑盒可在7天內(nèi)誘導(dǎo)人CD34+造血干/前體細(xì)胞擴(kuò)增達(dá)~10倍,是研究人CD34+造血干/前體細(xì)胞擴(kuò)增和功能、以及產(chǎn)生人CD34+造血干/前體細(xì)胞的重要培養(yǎng)系統(tǒng)。


產(chǎn)品特點(diǎn)

針對人CD34+造血干/前體細(xì)胞擴(kuò)增設(shè)計(jì)而成


產(chǎn)品成分

產(chǎn)品名稱

Catlog#

規(guī)格

儲存條件

人CD34+造血干/前體細(xì)胞擴(kuò)增試劑盒

CS-20008-50

1 kit

人CD34+造血干/前體細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基

CS-20008-B

50ml

4℃

人CD34+造血干/前體細(xì)胞擴(kuò)增補(bǔ)充因子

CS-20008-EXS

0.5ml

-20℃

預(yù)篩選造血干/前體細(xì)胞專用胎牛血清

CS-HSCF-5

5ml

-20℃


其他本試劑盒未提供但需用的重要試劑和組分

人CD34+細(xì)胞磁珠分選試劑

MS5基質(zhì)細(xì)胞


*培養(yǎng)基配制

(在無菌生物安全柜中,開展以下操作)

1.在4℃冰箱解凍補(bǔ)充因子和胎牛血清,混勻后使用。

注:解凍后的補(bǔ)充因子和血清可放置于4℃冰箱,在1個(gè)月內(nèi)使用;或者分裝至合適體積后,保存于-20℃冰箱,不可反復(fù)凍融!

2.擴(kuò)增培養(yǎng)基配制:將1體積的擴(kuò)增補(bǔ)充因子和10體積的血清加入到89體積的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,充分混勻,得到人CD34+造血干/前體細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)基。如取100ul補(bǔ)充因子和1ml血清加入至8.9ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基,以此類推。

注:配好的*培養(yǎng)基請于4℃保存,且于1個(gè)月內(nèi)使用完畢。


使用說明

(請?jiān)敿?xì)閱讀使用說明后再開始相關(guān)實(shí)驗(yàn))

1.D0:收集培養(yǎng)的MS5細(xì)胞,使用含10ng/ml的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞密度至<1*10^7/ml,置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中,37℃,5% CO2,孵育3小時(shí)。

2.使用20ml含有2.5%血清的PBS緩沖液*清洗MS5細(xì)胞

3.重復(fù)步驟2.

4.使用MS5培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞密度為2.5*10^5/ml,按照如下表格鋪于培養(yǎng)板,過夜培養(yǎng)使細(xì)胞貼壁:

培養(yǎng)板

MS5培養(yǎng)基體積

MS5細(xì)胞數(shù)/孔

96孔板

0.1ml

2.5*10^4

24孔板

0.5ml

1.25*10^5

5.D1:使用磁珠分選人CD34+造血干/前體細(xì)胞(參考所使用試劑盒的說明書),計(jì)數(shù)。
注:G-CSF富集的健康供體每100ml外周血中約含有5*10^5CD34+造血干/前體細(xì)胞。

6.使用擴(kuò)增培養(yǎng)基重懸CD34+造血干/前體細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞密度至5*10^4/ml,按照如下表格所示將細(xì)胞鋪于培養(yǎng)板(鋪板之前去除MS5培養(yǎng)基):

培養(yǎng)板

擴(kuò)增培養(yǎng)基體積

CD34+造血干/前體細(xì)胞數(shù)/孔

96孔板

0.2ml

1.0*10^4

24孔板

0.1ml

5.0*10^4

7.將培養(yǎng)板置于細(xì)胞培養(yǎng)箱,37℃,5%CO2,靜置培養(yǎng)。

8.D3:半量換液。小心貼培養(yǎng)板側(cè)壁用槍尖吸走1/2體積舊培養(yǎng)基,補(bǔ)充加入新鮮擴(kuò)增培養(yǎng)基至初始培養(yǎng)體積(步驟6表格)。

注:*培養(yǎng)基請恢復(fù)至室溫后使用,減少對細(xì)胞的刺激;

9.D6:半量換液,同步驟8.

10.D7:輕輕吹打細(xì)胞,收集懸浮細(xì)胞,即為擴(kuò)增的人CD34+造血干/前體細(xì)胞,可進(jìn)行后續(xù)操作和分析。

注:此步驟需輕柔吹打細(xì)胞,以免MS5基質(zhì)細(xì)胞脫落。一般來說,MS5基質(zhì)細(xì)胞貼壁牢固,輕柔吹打不會導(dǎo)致MS5脫落,操作人員可在顯微鏡下觀察確認(rèn)MS5脫落情況。


數(shù)據(jù)展示

圖:人CD34+造血干/前體細(xì)胞擴(kuò)增鑒定。磁珠分選的人CD34+造血干/前體細(xì)胞按照上述說明培養(yǎng)7天后,進(jìn)行表型鑒定及擴(kuò)增倍數(shù)鑒定。




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