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化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>技術(shù)服務(wù)>細(xì)胞生物學(xué)服務(wù)>細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù)>EC96311 Ar A4感受態(tài)(電轉(zhuǎn))

EC96311 Ar A4感受態(tài)(電轉(zhuǎn))

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱 上海語純生物科技有限公司
  • 品牌 其他品牌
  • 型號(hào) EC96311
  • 產(chǎn)地
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間 2024/10/31 9:45:15
  • 訪問次數(shù) 101
產(chǎn)品標(biāo)簽

Ar A4感受態(tài)(電轉(zhuǎn))

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     上海語純生物科技有限公司依托建立,是由具有資深生命科學(xué)、生物技術(shù)背景及人員共同創(chuàng)辦的技術(shù)型企業(yè)。
     公司專業(yè)經(jīng)營(yíng)生物科學(xué)領(lǐng)域的實(shí)驗(yàn)儀器、研究試劑和實(shí)驗(yàn)室耗材,致力于向國(guó)內(nèi)外生物科學(xué)研究人員提供優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。
     目前,公司推出的產(chǎn)品涵蓋了生物化學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域,因優(yōu)質(zhì)穩(wěn)定、性價(jià)比高等特點(diǎn)在廣大科研機(jī)構(gòu)、研究院校及相關(guān)企業(yè)中贏得了良好的聲譽(yù),從而建立了立體的營(yíng)銷網(wǎng)絡(luò)和擁有廣泛的客戶資源。

    公司向廣大用戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品的同時(shí),始終將客戶服務(wù)和技術(shù)支持放在比產(chǎn)品銷售更重要的位置上,公司聘請(qǐng)了專職、技術(shù)支持人員,為客戶提供專業(yè)性、個(gè)性化的技術(shù)服務(wù)。公司秉承"先做人,后做事"的理念,堅(jiān)持"以質(zhì)量為生命,以客戶為中心"的宗旨,把優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和貼心的服務(wù)奉獻(xiàn)給廣大客戶。






細(xì)胞,培養(yǎng)基,試劑,耗材儀器

產(chǎn)品簡(jiǎn)介
發(fā)根農(nóng)桿菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)農(nóng)桿菌屬(agrobacterium)的一種革蘭氏陰性土壤細(xì)菌,它能夠
感染 大多數(shù)雙子葉植物和少數(shù)單子葉植物以及個(gè)別裸子植物。Ar.A4 發(fā)根農(nóng)桿菌菌株含有農(nóng)桿堿型
Ri 質(zhì)粒,具有廣泛的宿主范圍(玉米,煙草,胡蘿卜,甘草等),同時(shí)具有卡那m素抗性。本公
司生產(chǎn)的 Ar.A4 化學(xué)轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,pK7WGF2 質(zhì)粒(壯觀m素抗性)檢測(cè),轉(zhuǎn)
化效率>10cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
Ar.A4
電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞
10 ×100 μL
100 ×100μL
定制
基因型:Agrobacterium rhizogenes(kan) Ar A4 Ri(agropine type)
存儲(chǔ)條件
-80 ℃保存請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留
電轉(zhuǎn)法轉(zhuǎn)化效率≥10cfu/μg DNA
使用方法
1. 0.1 cm 電擊杯和杯蓋從儲(chǔ)存液中拿出倒置于干凈的吸水紙上 分鐘,待其瀝干水分,正置 分鐘,使
乙醇充分揮發(fā),待乙醇揮發(fā)干凈立即插入冰中,壓實(shí)冰面,電極杯頂離冰面 0.5 cm 以方便蓋上杯蓋,冰
中靜置 分鐘充分降溫。
2. -80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)插入冰中 5分鐘,待其融化,加入 0.01-1 μg質(zhì)粒 DNA(體積不大于 6ul),
用手撥管底混勻,立即插入冰中,用200 μl槍頭將感受態(tài)-質(zhì)?;旌衔锟焖僖频诫姄舯?,蓋上杯蓋,
空管保留待用。
3. 啟動(dòng)電轉(zhuǎn)儀,設(shè)置參數(shù):C=25 μF,PC=200 ohm,V=2400 V(此參數(shù)為 Biorad 推薦,使用者也可按
所用電轉(zhuǎn)儀推薦的 protocol 操作),將電擊杯快速放入電轉(zhuǎn)槽中,電擊完成快速插入冰中,加入 900 μl
無抗生素的 LB 并轉(zhuǎn)移到感受態(tài)空管中,28℃振蕩培養(yǎng) 2~3 小時(shí)。
4. 6000 rpm 離心一分鐘收菌,留取 100 μl 左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的 LB 或 YEB
平板上,倒置放于 28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng) 2-3 天(當(dāng)平板只含有 50 μg/ml kan 時(shí),28℃培養(yǎng) 48 h 即可;平板中
同時(shí)加入 50 μg/ml kan,20 μg/ml rif 時(shí),需 28℃培養(yǎng) 60 h;如果使用的平板含有 50 μg/ml rif 則需要 28℃
培養(yǎng) 72-90 h)。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10
3. 利f平濃度不應(yīng)高于 25ug/ul,過高的利f平濃度不利于農(nóng)桿菌生長(zhǎng),會(huì)降低其生長(zhǎng)速度和轉(zhuǎn)化效率。
4. Ar.A4 具有卡那m素抗性,不可用于具有卡那m素抗性質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化。




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