呼吸道合胞病毒（RSV）感染是兒童住院的重要原因，并且是全球1歲以下嬰兒死亡的主要原因之一。RSV屬于肺炎病毒屬，含有一個(gè)單鏈、不分節(jié)段的負(fù)義RNA基因組，長(zhǎng)度約為15,200個(gè)核苷酸。病毒顆粒表面有三種蛋白質(zhì)：小疏水蛋白（SH）、附著蛋白（G）和融合蛋白（F）。G和F蛋白是主要的抗原蛋白。根據(jù)G蛋白的序列，RSV被分為A和B兩個(gè)亞群。

RSV核蛋白（N）對(duì)病毒的組裝和復(fù)制至關(guān)重要。它通過(guò)包裹整個(gè)病毒RNA基因組形成核糖核蛋白復(fù)合體，從而實(shí)現(xiàn)病毒的包膜化。RSV核蛋白在A和B亞群的RSV分離株中高度保守，氨基酸序列同源性超過(guò)95%。

Cell Biolabs的RSV核蛋白ELISA試劑盒是一種用于檢測(cè)和定量RSV核蛋白的酶免疫分析試劑盒。該ELISA試劑盒的抗體能夠識(shí)別RSV A型和B型的核蛋白。試劑盒的檢測(cè)靈敏度為313皮克/毫升RSV核蛋白。每個(gè)試劑盒提供的試劑足以進(jìn)行最多96次檢測(cè)，包括標(biāo)準(zhǔn)曲線和RSV裂解樣本。

作為Cell Biolabs全國(guó)總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Cell Biolabs銷售產(chǎn)品呼吸道合胞病毒核蛋白ELISA試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

呼吸道合胞病毒核蛋白ELISA試劑盒檢測(cè)原理

檢測(cè)原理

將抗RSV核蛋白單克隆抗體吸附在微量滴定板上。樣本或標(biāo)準(zhǔn)品中的RSV核蛋白會(huì)與吸附在板上的抗體結(jié)合；加入FITC標(biāo)記的抗RSV核蛋白多克隆抗體，與被第一抗體捕獲的RSV核蛋白結(jié)合。經(jīng)過(guò)孵育和洗滌步驟后，加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的抗FITC單克隆抗體，與FITC標(biāo)記的抗RSV核蛋白多克隆抗體結(jié)合。在洗滌步驟中去除未結(jié)合的HRP標(biāo)記的抗FITC抗體，然后向孔中加入與HRP反應(yīng)的底物溶液。根據(jù)樣本中RSV核蛋白的含量，會(huì)形成相應(yīng)比例的有色產(chǎn)物。通過(guò)加入終止液終止反應(yīng)，并在450納米處測(cè)量吸光度。使用重組RSV核蛋白標(biāo)準(zhǔn)品制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后確定樣本中RSV核蛋白的濃度。

相關(guān)產(chǎn)品

1. VPK-108-H：QuickTiter?慢病毒定量試劑盒（HIV-1 p24 ELISA）

2. VPK-150：QuickTiter?乙型肝炎核心抗原（HBcAg）ELISA試劑盒

3. VPK-151：QuickTiter?丙型肝炎核心抗原（HCcAg）ELISA試劑盒

4. VPK-156：QuickTiter?鼠白血病病毒核心抗原（MuLV p30）ELISA試劑盒

5. VPK-5169：腺病毒六鄰體ELISA試劑盒

6. VPK-5170：RSV融合蛋白ELISA試劑盒

7. VPK-5174：流感A核蛋白ELISA試劑盒

8. VPK-5175：流感B核蛋白ELISA試劑盒

試劑盒組成

盒子1（常溫運(yùn)輸）

1. 抗RSV核蛋白抗體包被板（部件號(hào)51711B）：一條96孔板。

2. FITC標(biāo)記抗RSV核蛋白多克隆抗體（部件號(hào)51712C）：一瓶20微升。

3. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗FITC單克隆抗體（部件號(hào)310811）：一瓶20微升。

4. 檢測(cè)稀釋液（部件號(hào)310804）：一瓶50毫升。

5. 10倍病毒裂解緩沖液（部件號(hào)51693B）：一瓶15毫升，含有200 mM Tris，pH 7.5，1500 mM NaCl，10% Triton X-100，1% SDS。

6. 10倍洗滌緩沖液（部件號(hào)310806）：一瓶100毫升。

7. 底物溶液（部件號(hào)310807）：一瓶1毫升2，琥珀色瓶。

8. 終止液（部件號(hào)310808）：一瓶12毫升。

盒子2（藍(lán)冰運(yùn)輸）

1. 重組RSV核蛋白標(biāo)準(zhǔn)品（部件號(hào)51713D）：一瓶100微升，2微克/毫升重組人RSV核蛋白（Met1-Leu391），含有BSA的PBS溶液。

未提供材料

1. RSV樣本：純化病毒或未純化的病毒上清液

2. 量離心機(jī)

3. 10微升至1000微升可調(diào)節(jié)單通道微量移液器及一次性吸頭

4. 50微升至300微升可調(diào)節(jié)多通道微量移液器及一次性吸頭

5. 多通道微量移液器儲(chǔ)液槽

6. 能在450納米處讀數(shù)的微孔板讀數(shù)儀（620納米為可選參考波長(zhǎng)）

保存方法

收到試劑盒后，將RSV核蛋白標(biāo)準(zhǔn)品分裝并保存在-20℃，避免反復(fù)凍融。其他所有組分保存在4℃。

結(jié)果示例

以下圖表展示了典型的RSV核蛋白ELISA檢測(cè)結(jié)果。僅可將以下數(shù)據(jù)作為參考，不應(yīng)用于解釋實(shí)際結(jié)果。

文獻(xiàn)參考：

1. Afonso, C. L. et al. (2016) Taxonomy of the order Mononegavirales. Arch. Virol. 161, 2351–2360.

2. Shi, T. et al. (2017) Global, regional, and national disease burden estimates of acute lower respiratory infections due to respiratory syncytial virus in young children in 2015: a systematic review and modelling study. Lancet 390, 946–958.

3. Bhella D., Ralph A., Murphy L. B., Yeo R. P. (2002) Significant differences in nucleocapsid morphology within the Paramyxoviridae. J Gen Virol 83, 1831–1839.

4. Tawar R. G., Duquerroy S., Vonrhein C., Varela P. F., Damier-Piolle L., Castagné N., MacLellan K., Bedouelle H., Bricogne G.. (2009) Crystal structure of a nucleocapsid-like nucleoprotein-RNA complex of respiratory syncytial virus. Science 326, 1279–1283.

Cell Biolabs公司位于美國(guó)加利福尼亞州南部重要的工業(yè)城市圣迭戈（San Diego），是有名的細(xì)胞學(xué)試劑品牌，作為前沿的細(xì)胞學(xué)分析檢測(cè)試劑盒生產(chǎn)商，為生物技術(shù)和研究類客戶提供好的基于細(xì)胞功能研究以及疾病等方面的g端產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。產(chǎn)品主要涵蓋細(xì)胞研究、細(xì)胞信號(hào)通路和蛋白質(zhì)生物學(xué)、代謝研究、病原體和毒素、干細(xì)胞研究等領(lǐng)域。全球眾多大學(xué)、政府研究機(jī)構(gòu)、生物、制藥企業(yè)的科研實(shí)驗(yàn)室均在使用Cell Biolabs的產(chǎn)品。  

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