產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

桃拉綜合征(Taura syndrome)是一種由桃拉綜合征病毒(Taura syndrome virus，TSV)感染而引起的嚴(yán)重威脅蝦養(yǎng)殖的重要疫病。TSV 幾乎能感染所有類(lèi)型的養(yǎng)殖蝦，并感染孵化期的蝦苗，其致病率高。

本試劑盒適用于檢測(cè)對(duì)蝦樣品等標(biāo)本中對(duì)蝦桃拉病毒 RNA，適用于對(duì)蝦桃拉病毒感染的輔助診斷。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

一、嚴(yán)格的質(zhì)控體系

所有試劑盒從原料到成品都經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量控制，確保每一盒試劑盒都具有穩(wěn)定可靠的質(zhì)量，讓您的檢測(cè)結(jié)果更可信。

二、高靈敏度

產(chǎn)品經(jīng)過(guò)不斷優(yōu)化，具有出色的靈敏度，能夠檢測(cè)到極微量的對(duì)蝦桃拉病毒核酸，不放過(guò)任何潛在的感染風(fēng)險(xiǎn)。

三、便捷操作

綜合各項(xiàng)指標(biāo)特性，研發(fā)出操作便捷的試劑盒。從樣本制備到結(jié)果分析，每一步都有清晰的操作指南，即使是新手也能輕松上手。

四、多樣的檢測(cè)驗(yàn)證樣本

該試劑盒經(jīng)過(guò)多種樣本的檢測(cè)驗(yàn)證，適用于對(duì)蝦樣品等多種常見(jiàn)樣本，滿足不同的檢測(cè)需求。

五、個(gè)性化定制服務(wù)

專(zhuān)業(yè)的研發(fā)團(tuán)隊(duì)可為您提供個(gè)性化的定制服務(wù)，根據(jù)您的特殊需求進(jìn)行產(chǎn)品優(yōu)化和調(diào)整，為您提供更貼合實(shí)際的檢測(cè)方案。

六、豐富的產(chǎn)品線

除了對(duì)蝦桃拉病毒(TSV)熒光PCR檢測(cè)試劑盒，我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒，滿足您在不同領(lǐng)域的檢測(cè)需求。

七、完善的售前售后服務(wù)

我們擁有完善專(zhuān)業(yè)的售前售后服務(wù)團(tuán)隊(duì)，在您購(gòu)買(mǎi)前為您提供詳細(xì)的產(chǎn)品咨詢和技術(shù)支持，購(gòu)買(mǎi)后為您解決使用過(guò)程中遇到的任何問(wèn)題，讓您無(wú)后顧之憂。

產(chǎn)品參數(shù)：

產(chǎn)品規(guī)格

50T/盒，可滿足一定規(guī)模的檢測(cè)需求。

檢測(cè)方法

實(shí)時(shí)熒光PCR，具有快速、準(zhǔn)確、靈敏等優(yōu)點(diǎn)。

適用儀器

ABI7500、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測(cè)儀。

標(biāo)本采集

采集送實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的樣品可以為稚蝦、半成蝦和成蝦。采集的樣品應(yīng)保持鮮活，0℃~4℃冷藏保存。

保存和運(yùn)輸

采集或處理好的樣品在 2℃~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò) 24 h；若需長(zhǎng)期保存，應(yīng)放置-70℃以下保存，凍融不超過(guò) 3 次。

使用方法：

1.樣品處理（樣本處理區(qū)）

1.1樣本前處理

隨機(jī)取 5 只~10 只新鮮的蝦作為采樣標(biāo)本，采集的部位包括：蝦頭部的鰓絲、肝胰腺、淋巴器官或血淋巴等組織(可部分或全部采集這些組織)。對(duì)于仔蝦或稚蝦，取整只蝦或蝦頭作為樣品。取鰓絲時(shí)，用滅菌過(guò)的剪刀去除頭部?jī)蓚?cè)的頭胸甲，露出鰓絲，然后用剪刀剪取鰓絲。取肝胰腺時(shí)，用滅菌的剪刀去除頭部以后的腹部，并用剪刀縱向從背部剪開(kāi)頭胸甲和肌肉，露出內(nèi)部的組織器官，其中深褐色的組織為肝胰腺，用剪刀剪取整塊肝胰腺組織。取淋巴器官時(shí)，用滅菌過(guò)的剪刀去除頭部以后的腹部，并用剪刀縱向從背部剪開(kāi)頭胸甲和肌肉，暴露出內(nèi)部的組織器官，在胃的腹側(cè)，肝胰腺的后面，取出白色、呈二裂片狀的淋巴器官。取血淋巴時(shí)，先用 1 mL 醫(yī)用注射器吸取 500 uL 檸檬酸鹽溶液，然后使蝦腹部朝上，將針頭水平插入正數(shù)第一和第二對(duì)游泳足之間，并一直插到最后一對(duì)胸部附器的凹陷處，然后緩慢吸取血淋巴。將采集的樣品，按每克樣品加入 1 mL TN 緩沖液然后用玻璃勻漿器將樣品勻漿。將勻漿液轉(zhuǎn)移至 1.5 mL 離心管中，4℃2000rmp 離心 5 min，吸取上清液備用。 

1.2核酸提取

推薦采用上海烜雅生物科技有限公司生產(chǎn)的核酸-提取試劑（離心柱法）進(jìn)行核酸提取，請(qǐng)按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)    行操作。

2.試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）

根據(jù)待檢測(cè)樣本總數(shù)，設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對(duì)照+1 管陽(yáng)性對(duì)照；反應(yīng)管數(shù)每滿 10 份，多配制 1 份)，每測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：

試劑TSV 反應(yīng)液酶液

用量19μL1μL

將混合好的測(cè)試反應(yīng)液分裝到 PCR 反應(yīng)管中，20μL/管。

3.加樣（樣本處理區(qū)）

將步驟 1 提取的核酸、陽(yáng)性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取 5μL，分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中，蓋好管蓋，混勻，

短暫離心。

4.PCR 擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）

4.1將待檢測(cè)反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi)；

4.2設(shè)置好通道、樣品信息，反應(yīng)體系設(shè)置為 25μL；熒光通道選擇：

檢測(cè)通道（Reporter Dye）FAM， 淬滅通道（Quencher Dye）NONE，ABI 系列儀器請(qǐng)勿選擇 ROX 參比熒光。

4.3推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置：

步驟循環(huán)數(shù)溫度時(shí)間收集熒光信號(hào)

11 cycle50℃10min否

21 cycle95℃2min否

345 cycles95℃15sec否

60℃30sec是

5.結(jié)果分析判定

5.1結(jié)果分析條件設(shè)定（請(qǐng)參照各儀器使用說(shuō)明書(shū)進(jìn)行設(shè)置，以分析 ABI7500 儀器為例）

反應(yīng)結(jié)束后自動(dòng)保存結(jié)果，根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 Start 值、End 值以及 Threshold 值（用戶可根據(jù)實(shí)際情況自行調(diào)整，Start 值可設(shè)在 3～15、End 值可設(shè)在 5～20，使閾值線位于擴(kuò)增曲線指數(shù)期，陰性質(zhì)控品的擴(kuò)增曲線平直或低于閾值線），點(diǎn)擊 Analyze 自動(dòng)獲得分析結(jié)果。

5.2結(jié)果判斷

陽(yáng)性：檢測(cè)通道 Ct 值≤40，且曲線有明顯的指數(shù)增長(zhǎng)曲線； 陰性：樣本檢測(cè)結(jié)果 Ct 值>40 或無(wú) Ct 值。

5.3質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

陰性質(zhì)控品：無(wú)特異性擴(kuò)增曲線或無(wú) Ct 值顯示；

陽(yáng)性質(zhì)控品：擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)增長(zhǎng)期，且 Ct 值≤32； 以上條件應(yīng)同時(shí)滿足，否則實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。

6.檢測(cè)方法的局限性

1.樣本檢測(cè)結(jié)果與樣本收集、處理、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān)；

2.樣本提取過(guò)程中沒(méi)有控制好交叉污染，會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果；

3.陽(yáng)性對(duì)照、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏，會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果；

4.病原體在流行過(guò)程中基因突變、重組，會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果；

5.不同的提取方法存在提取效率差異，會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果；

6.試劑運(yùn)輸，保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測(cè)效能下降，出現(xiàn)假陰性或定量檢測(cè)不準(zhǔn)確的結(jié)果；

7.本檢測(cè)結(jié)果僅供參考，如須確診請(qǐng)結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測(cè)手段。

注意事項(xiàng)：

1.所有操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行；

2.試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化，完-全混勻并短暫離心；

3.反應(yīng)液應(yīng)避光保存；

4.反應(yīng)中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊；

5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專(zhuān)用工作服；

6.樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行，以免交叉污染；

7.實(shí)驗(yàn)完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺(tái)和移液器；

8.試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對(duì)待，并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通則》進(jìn)行處理。

9.本產(chǎn)品僅供科研。

選擇我們的對(duì)蝦桃拉病毒(TSV)熒光PCR檢測(cè)試劑盒，就是選擇精準(zhǔn)、高效、可靠的檢測(cè)方案，為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航！