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Ni-NTA蛋白純化樹脂 試劑是一種親和層析基質(zhì)，用于純化攜帶His標簽的重組蛋白。

His標簽中的組氨酸殘基以高特異性和親和性結(jié)合到固定鎳離子配位球的空位上。

清除的細胞裂解物被裝載到基質(zhì)上。他標記的蛋白質(zhì)結(jié)合在一起，其他蛋白質(zhì)穿過基質(zhì)。

洗滌后，his標記的蛋白質(zhì)在天然或變性條件下在緩沖液中洗脫

QIAexpress Ni-NTA蛋白純化系統(tǒng)是基于Ni-NTA（鎳-硝基三乙酸）樹脂

對含有6個或更多組氨酸殘基（連續(xù)或交替）親和標簽- His標簽的蛋白質(zhì)的顯著選擇性。

該技術允許在原生或變性條件下從任何表達系統(tǒng)中一步純化幾乎任何his標記的蛋白質(zhì)。

NTA對鎳離子有四個螯合位點，與金屬螯合凈化系統(tǒng)相比，它能更緊密地結(jié)合鎳，

而金屬螯合凈化系統(tǒng)只有三個位點可與金屬離子相互作用。

額外的螯合位點防止鎳離子浸出，并導致更大的結(jié)合能力和更高純度的蛋白質(zhì)制備，

比使用其他金屬螯合純化系統(tǒng)獲得的。QIAexpress系統(tǒng)可用于從任何表達系統(tǒng)中純化his標記蛋白，

包括桿狀病毒、哺乳動物細胞、酵母和細菌 his標記蛋白的純化包括4個階段：

細胞裂解、結(jié)合、洗滌和洗脫（見用Ni-NTA蛋白純化系統(tǒng)純化蛋白質(zhì)）。

使用QIAexpress系統(tǒng)純化重組蛋白不依賴于蛋白質(zhì)的三維結(jié)構或6xHis標簽。

這允許一步蛋白質(zhì)純化在原生或變性條件下，從稀溶液和粗裂解物。

強變性劑和清潔劑可用于有效的增溶和純化受體、膜蛋白和形成包涵體的蛋白質(zhì)。

能夠有效去除非特異性結(jié)合污染物的試劑可以包括在洗滌緩沖液中（見表）。

通過加入100-250 mM咪唑作為競爭對手或降低pH值，在溫和條件下洗脫純化的蛋白質(zhì)

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