Cetrans懸浮細(xì)胞專用細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑

產(chǎn)品介紹

Cetrans懸浮細(xì)胞專用轉(zhuǎn)染試劑是一種陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑，經(jīng)優(yōu)化專門用于懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，且適用于DNA、RNA和寡核苷酸的轉(zhuǎn)染，對大多數(shù)真核細(xì)胞具有很高的轉(zhuǎn)染效率。本產(chǎn)品以無菌的液體形式提供。

轉(zhuǎn)染效率高、低細(xì)胞毒性、細(xì)胞死亡率低，有利于蛋白質(zhì)的大量生產(chǎn)。特別適合基因治療企業(yè)大規(guī)模的懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染！

 注意事項

1. 為得到很好的轉(zhuǎn)染效率，請先用無血清培養(yǎng)基（如Cesuper®MEM減血清培養(yǎng)基）稀釋Cetrans懸浮細(xì)胞專用轉(zhuǎn)染試劑，之后與DNA或RNA做混合。
2. 使用高質(zhì)量的DNA或RNA有助于獲得較高的轉(zhuǎn)染效率，務(wù)必確保質(zhì)粒的高純度和無菌狀態(tài)，去除質(zhì)粒提取過程中可能殘留的苯酚和高鹽，因為上述酚類會對細(xì)胞造成損失，而高鹽分會干擾“Cetrans懸浮細(xì)胞專用轉(zhuǎn)染試劑 -復(fù)合物”的形成。質(zhì)粒中的內(nèi)毒素也是轉(zhuǎn)染的大敵，務(wù)必去除。
3. 轉(zhuǎn)染時培養(yǎng)基中不能添加抗生素。
4. Cetrans懸浮細(xì)胞專用轉(zhuǎn)染試劑應(yīng)該在4℃保存，要注意避免多次反復(fù)長時間開蓋，因為可能會導(dǎo)致Cetrans懸浮細(xì)胞專用轉(zhuǎn)染試劑氧化而影響轉(zhuǎn)染效率。
5. 需優(yōu)化DNA濃度和Cetrans懸浮細(xì)胞專用轉(zhuǎn)染試劑以得到最大的轉(zhuǎn)染效率。DNA和Cetrans懸浮細(xì)胞專用轉(zhuǎn)染試劑的比例，通常推薦是1:2 或1:3。

操作案例
推薦轉(zhuǎn)染條件（以293懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染為例）
最終轉(zhuǎn)染體積：30 mL
轉(zhuǎn)染細(xì)胞數(shù)目：3×10⁷ cell（最終細(xì)胞密度：1×10⁶ cell/mL），轉(zhuǎn)染之前需要確保細(xì)胞健康，細(xì)胞活力>90%。
質(zhì)粒DNA量：20-40 μg (通常30 μg)
轉(zhuǎn)染試劑量：40-80 μL (通常60 μL). 使用 2 μLCetrans懸浮細(xì)胞專用轉(zhuǎn)染試劑每 1 μg 質(zhì)粒DNA 用于轉(zhuǎn)染。

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