2× KOD PCR Master Mix (含染料)

2× KOD PCR Master Mix(含染料)

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產品內容

保存條件

-20℃保存，有效期 2 年。經(jīng)常使用，可置于 4 °C 保存，有效期 3 個月。

具體產品的參數(shù)以收到產品說明書的參數(shù)為準

產品簡介

本產品包含KOD DNA Polymerase、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液，濃度為2×。該酶所具有的chao強3’→ 5’外切酶活性使得其保真性比Pfu DNA Polymerase 更高，保真性是Taq DNA Polymerase的80倍，同時具有合成速度快的特點，聚合速度約為普通Pfu DNA Polymerase的5倍，Taq DNAPolymerase的2倍，達到100-138bp/秒，可以在短時間內獲得高產量的擴增產物，特別適合于高保真地擴增6kb以內的PCR 產物，擴增所得的DNA為平末端，可用于基因克隆、表達及突變分析等分子生物學實驗。

KOD擴增的PCR產物為平末端（Blunt），可直接用于Blunt載體克?。–at#V116、V117）

本產品含紅色示蹤染料，不需添加上樣緩沖液即可直接上樣進行電泳；也可經(jīng)過純化處理，以用于酶切、連接、測序等后續(xù)操作。

產品特點

1. 高產：產量是普通 Taq 酶的 2 倍！

2. 高效：延伸速度 100-138bp/sec！

3. 高成功率：對于高 GC 模板和特殊結構的復雜模板有良好效果！

2 × KOD PCR Master Mix 使用說明：

一、配制 PCR 反應體系：(于冰上配制)

參考模板用量：（以 50 μl 反應體系為例）

質粒：0.1-10 ng；

細菌基因組：10-100 ng；

人類基因組：50-150 ng；

cDNA：1-5 μl from RT。

注意：用 ddH2O 補足反應體系（體積）至 50 μl。實際操作中，首先要計算好需要補加 ddH2O 的量以后，建議先加水，然后按上述順序添加其它成分，最后添加 KOD DNA Polymerase。充分混勻后，離心數(shù)秒使反應混合物沉到管底，然后將反應管置于 PCR 儀中進行擴增。

二、設置 PCR 循環(huán)條件：（請根據(jù)實際情況適當調整）

注意：一般情況下，Annealing Temperature = Tm - 5°C

如果擴增片段小于 4 kb，建議 KOD 酶的延伸速度為 1kb / 15 sec；

如果擴增片段大于 4 kb，建議延伸速度為 1kb / 20-30 sec。

三、結果檢測：反應結束后取 5 µl 反應產物，瓊脂糖凝膠電泳檢測。

2× KOD PCR Master Mix(含染料)