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化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>試劑標(biāo)物>行業(yè)專用試劑>生化與分子生物學(xué)用試劑>71519 2 x SYBR Green qPCR Mix 熒光定量

71519 2 x SYBR Green qPCR Mix 熒光定量

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
  • 品牌 NobleRyder/諾博萊德
  • 型號(hào) 71519
  • 產(chǎn)地 北京
  • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間 2025/7/17 18:24:41
  • 訪問(wèn)次數(shù) 119

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北京諾博萊德科技有限公司始創(chuàng)于2012年,總部位于北京海淀區(qū),專注于科研生物領(lǐng)域,是一家研發(fā)、銷售和服務(wù)于一體的企業(yè)。公司秉承“誠(chéng)信為本,博采眾長(zhǎng)”的發(fā)展理念,致力于為科研工作者提供高質(zhì)量的生物產(chǎn)品和服務(wù)。

諾博萊德的產(chǎn)品覆蓋面廣泛,包括以下

生化試劑:抗生素、蛋白質(zhì)、染色劑、培養(yǎng)基、緩沖試劑、對(duì)照品、標(biāo)準(zhǔn)品、磁珠;

即用型試劑:常規(guī)試劑溶液、即用型染色液、免疫學(xué)試劑、細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞分離液人或其他動(dòng)物細(xì)胞;

通用耗材:移液管/架、吸頭、槍頭、移液器、離心管/盒/架、PCR耗材、濾紙、口罩手套、冷/凍存管/盒、培養(yǎng)板/皿/瓶、蓋/載玻片、刀片、包埋盒/框、封片劑、石蠟、鏡油等產(chǎn)品被國(guó)內(nèi)科研工作者廣泛應(yīng)用。

 

生化試劑,即用型試劑,分子生物學(xué),細(xì)胞生物學(xué)

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 500rxn(20μl/rxn)
貨號(hào) 71519 應(yīng)用領(lǐng)域 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥
主要用途 用于消除信號(hào)本底以及校正孔與孔之間產(chǎn)生的熒光信號(hào)誤差

2x SYBR Green qPCR Mix(With 100x ROX)


2 x SYBR Green qPCR Mix 熒光定量


目錄號(hào):71519

產(chǎn)品內(nèi)容

Components

71519-500

500 rxns (20 μl/rxn)

71519-2500

2500 rxns (20 μl/rxn)

2x   SYBR Green qPCR Mix

1.25   ml x4

1.25   ml x20

100x ROX

100   μl

100   μl x5

RNase-Free   H2O

5   ml

5   ml x5

保存條件

-20℃保存,有效期 24 個(gè)月, 使用前充分融解,輕柔顛倒混勻。短期使用可放在 4 ℃,避免反復(fù)凍融。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

2x SYBR Green qPCR Mix是SYBR Green I 嵌合染料法專用的qPCR試劑,為2x 預(yù)混液,包含除引物和DNA樣品以外的所有qPCR組分,可減少操作步驟,縮短加樣時(shí)間,降低污染幾率。其核心組分是全新的Hotmaster Taq DNA聚合酶,配合精心優(yōu)化的Buffer體系,有效抑制非特異性擴(kuò)增,可對(duì)寬廣濃度范圍的模板進(jìn)行準(zhǔn)確定量,獲得穩(wěn)定可靠的qPCR結(jié)果,具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好等特點(diǎn)。





本產(chǎn)品含有獨(dú)立包裝參比染料100x ROX(50µmol/µl),用于消除信號(hào)本底以及校正孔與孔之間產(chǎn)生的熒光信號(hào)誤差,不同儀器所需ROX Reference Dye濃度不同,見下表。


快捷用法:

1. 需要高濃度ROX的機(jī)型(終濃度為0.5 µmol/µl):每1.25ml 2x SYBR Green qPCR mix加入25µl 100x ROX,充分混勻后,可以直接使用。

2. 需要低濃度ROX的機(jī)型(終濃度為0.05 µmol/µl):每1.25ml 2x SYBR Green qPCR mix加入2.5µl 100x ROX,充分混勻后,可以直接使用。

操作步驟:

1. 將DNA模板、引物、2 x SYBR Green qPCR Mix、RNase-Free H2O溶解并置于冰上備用。

2. 冰上配制qPCR反應(yīng)體系:(以20μl反應(yīng)體系為例)

Components

Volume (20μl)

Final Concentration

2x   SYBR Green qPCR Mix

10   μl

DNA   Template

Variable

As   required

Forward   Primer (10μM)

0.4   μl

0.2   μM each

Reverse   Primer (10μM)

0.4   μl

0.2   μM each

RNase-Free   H2O

Up   to 20 μl

Not   applicable

注意:

1) 推薦模板加樣量為1-2 μl / 20μl反應(yīng)體系,cDNA原液≤總反應(yīng)體系的10%,基因組DNA的量為10 - 100 ng。因不同種類的DNA模板中含有的靶基因拷貝數(shù)不同,可對(duì)模板進(jìn)行梯度稀釋,以確定最佳的模板使用量。

2) 通常推薦引物濃度為0.2 μM,就可以得到較好的結(jié)果,反應(yīng)效果不佳時(shí)可在0.1 - 1.0 μM范圍內(nèi)進(jìn)行調(diào)整。擴(kuò)增效率不高的情況下,可提高引物濃度;發(fā)生非特異性反應(yīng)時(shí),可降低引物濃度,由此優(yōu)化反應(yīng)體系。

3) 舉例為常規(guī)PCR反應(yīng)體系和反應(yīng)程序,實(shí)際操作中應(yīng)根據(jù)模板、引物結(jié)構(gòu)和目的片段大小不同進(jìn)行相應(yīng)的改進(jìn)和優(yōu)化。

3. qPCR反應(yīng)程序

注意:

1) 本產(chǎn)品兼容性強(qiáng),絕大多數(shù)情況下使用二步法和三步法均可獲得良好效果。建議采用兩步法qPCR反應(yīng)

程序。一般來(lái)說(shuō),二步法擴(kuò)增特異性高,三步法擴(kuò)增效率高。如果融鏈曲線較差,可以嘗試兩步法擴(kuò)增

或提高退火溫度;如果因使用Tm值較低的引物等原因,得不到良好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí),可嘗試加長(zhǎng)延伸時(shí)間或者進(jìn)行三步法PCR擴(kuò)增。

2) 根據(jù)引物的Tm值進(jìn)行退火&延伸(退火)溫度的設(shè)定;

3) 延伸(退火&延伸)時(shí)間的設(shè)置還需要根據(jù)您所使用的qPCR儀所需要的最短數(shù)據(jù)采集時(shí)間自行調(diào)整。

4) 融解曲線分析請(qǐng)以所使用的熒光定量PCR儀推薦的程序進(jìn)行設(shè)定。


2 x SYBR Green qPCR Mix 熒光定量




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