BP6007 4-香豆酸：fu酶A 連接酶試劑盒 其他系列
- 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號(hào) BP6007
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時(shí)間 2025/7/17 21:44:01
- 訪問(wèn)次數(shù) 114
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/24S |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | BP6007 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
| 主要用途 | 主要催化肉桂酸生成相應(yīng)的肉桂酸輔mei A酯 |
4-香豆酸：fu酶A 連接酶（ 4-coumarate:CoA ligase，4CL)試劑盒說(shuō)明書
分光光度法 50 管/24 樣
正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義：
4CL 是連接苯丙酸途徑與木質(zhì)素特異合成途徑的關(guān)鍵酶，主要催化肉桂酸生成相應(yīng)的肉桂酸fu酶A酯，是合成木質(zhì)素與其他苯丙烷類化合物的代謝流向調(diào)控點(diǎn)。該酶主要存在于高等植物、酵母和菌類中，研究該酶可以探討多種生物細(xì)胞發(fā)育過(guò)程中木質(zhì)素沉積的代謝機(jī)理，為減少水果石細(xì)胞含量而提高其品質(zhì)提供依據(jù)。
測(cè)定原理：
4CL 催化 4-香豆酸和CoA 生成 4-香豆酸CoA，在 333nm 下測(cè) 4-香豆酸CoA 生成速率，即可反映 4CL活性。
4-香豆酸：fu酶A 連接酶試劑盒 其他系列
試劑的組成和配制：
產(chǎn)品名稱 | BP6007-50T/24S | Storage |
提取液：液體 | 60ml | 4℃ |
試劑一：液體 | 60ml | 4℃ |
試劑二：粉劑 | 2 瓶 | -20℃ |
說(shuō)明書 | 一份 | |
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1ml 石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書的參數(shù)為準(zhǔn)
粗酶液提?。?/span>
細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104 個(gè)）：提取液體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1ml 提取液），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）；8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。
組織：
按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1ml 提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。
測(cè)定步驟：
1、分光光度計(jì) 40℃預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 333nm，蒸餾水調(diào)零。
2、樣本測(cè)定
（1） 在試劑二中加入 12.5ml 試劑一充分溶解混勻，置于 40℃水浴預(yù)熱 10min；現(xiàn)配現(xiàn)用（配好后 24h
內(nèi)用完）；
（2） 測(cè)定管：在 1ml 石英比色皿中加入 50μl 樣本和 950μl 試劑二，混勻，立即記錄 333nm 處 40℃
反應(yīng) 30min 后的吸光值A2。
對(duì)照管：在 1ml 石英比色皿中加入 50μl 樣本和 950μl 試劑一，混勻，立即記錄 333nm 處 40℃
反應(yīng) 30min 后的吸光值A1，計(jì)算ΔA=A2-A1。
注意：每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。
4CL 活性計(jì)算：
（1） 按樣本蛋白濃度計(jì)算：
單位定義：每 mg 組織蛋白每分鐘生成 1 nmol4-香豆酸fu酶A 定義為一個(gè)酶活力單位。
4CL（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=31.75×ΔA÷Cpr
（2） 按樣本鮮重計(jì)算：
單位定義：每 g 組織每分鐘生成 1 nmol 4-香豆酸fu酶A 定義為一個(gè)酶活力單位。
4CL（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109]÷(W ×V 樣÷V 樣總) ÷T=31.75×ΔA÷W
（3） 按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：
單位定義：每 1 萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成 1 nmol 4-香豆酸fu酶A 定義為一個(gè)酶活力單位。
4CL（nmol/min/104 cell）＝[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109]÷(500×V 樣÷V 樣總) ÷T=0.063×ΔA
V 反總：反應(yīng)體系總體積，1×10-3 L；ε：4-香豆酸fu酶A 摩爾消光系數(shù)，2.1×104 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V 樣：加入樣本體積，0.05 ml；V 樣總：加入提取液體積，1 ml；T：反應(yīng)時(shí)間，30 min； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本質(zhì)量，g；500：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，500 萬(wàn)。
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