BP6019 單胺氧化酶試劑盒 其他系列-常備現(xiàn)貨
- 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號(hào) BP6019
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時(shí)間 2025/7/17 21:55:56
- 訪問(wèn)次數(shù) 100
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/48S |
---|---|---|---|
貨號(hào) | BP6019 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
主要用途 | 單胺氧化酶試劑盒 |
單胺氧化酶(Monoamine Oxidase,MAO)試劑盒說(shuō)明書
分光光度法 50 管/48 樣
正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義:
MAO(EC1.4.3.4) 主要存在于脊椎動(dòng)物的各種器官,特別是分泌腺、腦、肝臟,在無(wú)脊椎動(dòng)物、豆類的芽等植物中也存在催化單胺類物質(zhì)代謝,含量較低,具有重要的生理功能,其活性能反映肝纖維化的程度。此外,MAO 活性異常導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)運(yùn)轉(zhuǎn)出現(xiàn)紊亂,從而引發(fā)多種病癥。
測(cè)定原理:
MAO 催化單胺類底物脫氨生成相應(yīng)的醛,進(jìn)一步氧化成酸;底物在 360nm 處有特征吸收峰,測(cè)定360nm 光吸收下降的速率,計(jì)算MAO 活性。
單胺氧化酶試劑盒 其他系列-常備現(xiàn)貨
試劑組成和配制:
產(chǎn)品名稱 | BP6019-50T/48S | Storage |
提取液:液體 | 50ml | 4℃ |
提取液:液體 | 50ml | 4℃ |
試劑一:液體 | 100ml | 4℃ |
試劑二:液體 | 5ml | 4℃避光 |
說(shuō)明書 | 一份 |
需自備儀器和用品:
天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 ml 玻璃比色皿、蒸餾水。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書的參數(shù)為準(zhǔn)
粗酶液?。?/span>
1、組織:
按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1ml 提取液一)進(jìn)行冰浴勻漿,10000g,4℃,離心 10min,棄沉淀;把上清轉(zhuǎn)移到另一預(yù)冷的離心管,10000g,4℃,離心 30min,棄上清;加入 1.0 ml 預(yù)冷的提取液二,震蕩混勻,16000g,4℃,離心 40min,棄上清;沉淀加入預(yù)冷的 1.0 ml 試劑一,震蕩混勻,即粗酶液(可用于可溶性蛋白濃度測(cè)定)取上清置于冰上待測(cè)。
2、細(xì)菌、真菌:
按照細(xì)胞數(shù)量(104 個(gè)):提取液體積(ml)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬(wàn)細(xì)胞加入 1ml 提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,總時(shí)間 3min);然后 10000g,4℃,離心 10min,棄沉淀;把上清轉(zhuǎn)移到另一預(yù)冷的離心管,10000g,4℃,離心 30min,棄上清;加入 1.0 ml預(yù)冷的提取液二,震蕩混勻,16000g,4℃,離心 40min,棄上清;沉淀加入預(yù)冷的 1.0 ml 試劑一,震蕩混勻,即粗酶液(可用于可溶性蛋白濃度測(cè)定),取上清置于冰上待測(cè)。
3、血清:直接測(cè)定。
測(cè)定步驟:
試劑名稱(µl) | 空白管 | 測(cè)定管 |
酶液(µl) | 100 | |
試劑一(µl) | 900 | 800 |
試劑二(µl) | 100 | 100 |
混勻,1 ml 玻璃比色皿,對(duì)照管調(diào)零,測(cè)定 360nm 處吸光值A1,然后 37℃水浴 60min,測(cè)定 360nm處吸光值A2,△A= A1- A2。注意:空白管只需測(cè)定一次。
MAO 活性計(jì)算公式 :
1、按蛋白含量計(jì)算
酶活定義:37℃,pH7.6 時(shí),每毫克蛋白質(zhì) 1min 內(nèi)轉(zhuǎn)化 1nmol 底物的酶量為一個(gè)酶活單位。
DAO 活性(nmol/min / mg prot)= 2、按樣本質(zhì)量計(jì)算
e′ d ×V 反總÷(V 樣×Cpr)÷T= 114×ΔA÷Cpr
酶活定義:37℃,pH7.6 時(shí),每克樣品 1min 內(nèi)轉(zhuǎn)化 1nmol 底物的酶量為一個(gè)酶活單位。
DAO 活性(nmol/min / g 鮮重)=e′ d ×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×W)÷T = 114×ΔA÷ W 3、按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算
酶活定義:37℃,pH7.6 時(shí),每 104 個(gè)細(xì)胞 1min 內(nèi)轉(zhuǎn)化 1nmol 底物的酶量為一個(gè)酶活單位。
DAO 活性(nmol/min / 104 cell)=
= 114×ΔA÷細(xì)胞數(shù)量 4、按照液體體積計(jì)算
e′ d ×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×細(xì)胞數(shù)量)÷T
酶活定義:37℃,pH7.6 時(shí),每升血清 1min 內(nèi)轉(zhuǎn)化 1nmol 底物的酶量為一個(gè)酶活單位。
DAO 活性(nmol/min /L)=e′ d ×V 反總÷V 樣=114000×ΔA
ε:底物摩爾消光系數(shù),1.46 L/mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V 反總:反應(yīng)總體積,1ml;V 樣:反應(yīng)中樣本體積,0.1ml;V 樣總:加入提取液體積,1ml;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/ml;T:反應(yīng)時(shí)間,60min, W:樣本質(zhì)量,g
注意事項(xiàng):
1、吸光度變化應(yīng)該控制在 0.01~0.8 之間。否則加大樣品量或稀釋樣品,注意計(jì)算公式中參與計(jì)算的稀釋倍數(shù)要相應(yīng)改變。
2、樣品蛋白質(zhì)含量需要另外測(cè)定。