美德聲推出細胞過敏原刺激試驗ELISA試劑

產(chǎn)品簡介

過敏原與嗜堿性粒細胞和肥大細胞等特殊細胞上的 IgE 分子接觸時會產(chǎn)生和/或分泌過敏介質(zhì)，例如白三烯或組胺。與組胺相反，在假性過敏的情況下，白三烯也被合成和釋放，反應(yīng)類似于過敏，但不涉及任何 IgE 分子。

CAST® ELISA 即細胞過敏原刺激試驗試劑，也可以被視為體外過敏激發(fā)試驗。收集的患者白細胞血液分?jǐn)?shù)將在體外暴露于可疑的特定過敏原。孵育后，細胞上清液將通過高度特異性的 ELISA 檢測磺胺三烯的從頭合成。

該測試不僅可以檢測 IgE 介導(dǎo)的過敏，還可以檢測假性過敏。后一種過敏以阿司匹林 （ASA） 和其他非甾體抗炎藥 （NSAID） 以及各種其他藥物或食品添加劑而聞名。

CAST® ELISA 的主要應(yīng)用

CAST® 檢測可用于確認(rèn)任何 IgE 介導(dǎo)的過敏，但經(jīng)典檢測（病史、皮膚試驗、規(guī)格 IgE）的結(jié)果存在爭議。有關(guān)過敏特定領(lǐng)域的更多信息，請對細胞過敏進行獨立測試。

檢測原理

美德聲CAST® ELISA 是一種基于酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）的技術(shù)，用于測量白細胞在受到過敏原刺激后釋放的硫化白三烯（sLT）。測試過程包括以下幾個步驟：

1.       白細胞分離：患者血液中加入右旋糖酐增加粘度，紅細胞沉降后，白細胞和血小板留在血漿中。通過離心分離白細胞，并在含有白細胞介素3（IL-3）的刺激緩沖液中重懸。

2.       細胞刺激：白細胞在37°C下孵育40分鐘，以刺激其釋放sLT。刺激后，細胞通過離心分離，上清液用于ELISA檢測。

3.       白三烯測定：使用預(yù)先包被的多克隆抗小鼠IgG的微孔板進行ELISA檢測。細胞上清液、標(biāo)準(zhǔn)品和對照品與酶標(biāo)記的白三烯D4和特異性抗sLT抗體一起孵育。通過添加底物溶液（pNPP）和停止溶液（2N NaOH）來測量吸光度。

試劑供應(yīng)與準(zhǔn)備

·       細胞分離和刺激試劑：包括右旋糖酐溶液、含有IL-3的刺激緩沖液、抗IgE受體抗體和fMLP的刺激對照。

·       ELISA試劑：包括預(yù)先包被的微孔板、洗液、ELISA緩沖液、標(biāo)準(zhǔn)品、對照品、酶標(biāo)記物、抗體、底物溶液和停止溶液。

樣本采集與儲存

·       樣本要求：建議患者在采集樣本前避免使用抗組胺藥、皮質(zhì)類固醇或色甘酸鈉等抗過敏藥物。

·       樣本儲存：采集的全血應(yīng)在2-8°C下儲存，避免離心或冷凍。

檢測程序

1.       標(biāo)準(zhǔn)曲線制備：通過系列稀釋標(biāo)準(zhǔn)品制備標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.       細胞刺激：根據(jù)樣本量和試劑體積進行細胞刺激。

3.       ELISA程序：包括微孔板的洗滌、標(biāo)準(zhǔn)品和樣本的添加、酶標(biāo)記物和抗體的孵育、底物溶液的添加以及吸光度的測量。

結(jié)果計算

·       標(biāo)準(zhǔn)曲線：通過測量每個標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

·       樣本和對照：測量樣本和對照的吸光度，計算sLT濃度。

質(zhì)量控制

·       空白吸光度：<200 mOD

·       50%結(jié)合劑量（ED-50）：200-400 pg/mL sLT

·       患者背景：<200 pg/mL sLT

·       刺激對照：>200 pg/mL sLT

結(jié)果解釋

·       刺激對照：在過敏和非過敏個體中，刺激對照的凈刺激產(chǎn)量（扣除背景后）應(yīng)至少為200 pg/mL。

·       過敏原刺激：對于吸入性和食物過敏原，建議凈刺激產(chǎn)量高于200 pg/mL sLT視為陽性。

性能特征

·       細胞刺激動力學(xué)：sLT的產(chǎn)生在40分鐘孵育后達到穩(wěn)定。

·       ELISA精密度：2.5小時出結(jié)果。

適用范圍

·       臨床應(yīng)用：用于診斷和監(jiān)測炎癥性疾病，如炎癥性腸病（IBD）。

·       研究應(yīng)用：用于研究過敏反應(yīng)和其他炎癥性疾病的發(fā)病機制。

訂購信息

通過CAST® ELISA，臨床醫(yī)生可以更準(zhǔn)確地診斷和監(jiān)測炎癥性疾病，從而優(yōu)化患者的治療方案。

我們的用戶

美德聲提供的產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于各類臨床實驗室，公共衛(wèi)生中心實驗室，CDC疾病控制中心實驗室等需要高質(zhì)量檢測單位。

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