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化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>試劑標(biāo)物>行業(yè)專用試劑>生化與分子生物學(xué)用試劑>BW6010 單脫氫抗壞血酸還原酶活性測定試劑盒

BW6010 單脫氫抗壞血酸還原酶活性測定試劑盒

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
  • 品牌 NobleRyder/諾博萊德
  • 型號 BW6010
  • 產(chǎn)地
  • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間 2025/7/18 9:09:22
  • 訪問次數(shù) 93

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北京諾博萊德科技有限公司始創(chuàng)于2012年,總部位于北京海淀區(qū),專注于科研生物領(lǐng)域,是一家研發(fā)、銷售和服務(wù)于一體的企業(yè)。公司秉承“誠信為本,博采眾長”的發(fā)展理念,致力于為科研工作者提供高質(zhì)量的生物產(chǎn)品和服務(wù)。

諾博萊德的產(chǎn)品覆蓋面廣泛,包括以下

生化試劑:抗生素、蛋白質(zhì)、染色劑、培養(yǎng)基、緩沖試劑、對照品、標(biāo)準(zhǔn)品、磁珠;

即用型試劑:常規(guī)試劑溶液、即用型染色液、免疫學(xué)試劑、細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、檢測試劑盒、細(xì)胞分離液人或其他動物細(xì)胞;

通用耗材:移液管/架、吸頭、槍頭、移液器、離心管/盒/架、PCR耗材、濾紙、口罩手套、冷/凍存管/盒、培養(yǎng)板/皿/瓶、蓋/載玻片、刀片、包埋盒/框、封片劑、石蠟、鏡油等產(chǎn)品被國內(nèi)科研工作者廣泛應(yīng)用。

 

生化試劑,即用型試劑,分子生物學(xué),細(xì)胞生物學(xué)

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100T/96S
貨號 BW6010 應(yīng)用領(lǐng)域 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥
主要用途 MDHAR 催化MDHA 還原生成AsA,在抗壞血酸氧化還原代謝中具有重要作用。


單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR活性測定試劑盒說明書

微量法 100T/96S

正式測定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定測定意義:

MDHAR 催化MDHA 還原生成AsA,在抗壞血酸氧化還原代謝中具有重要作用。

測定原理:

MDHAR 催化 NADH 還原MDHA 生成 AsA NAD+,NADH  340 nm 有特征吸收峰,但是 NAD+沒有。通過測定 340 nm 光吸收下降速率,來計(jì)算MDHAR 活性。

單脫氫抗壞血酸還原酶活性測定試劑盒

組成:

產(chǎn)品名稱

BW6010-100T/96S

Storage

試劑一:液體

100ml

4℃

試劑二:液體

20ml

室溫

試劑三:粉劑

1

4℃

試劑四:粉劑

1

4℃

試劑五:液體

15μl

4℃

說明書

一份

 

試劑三:粉劑×1 瓶(棕色),4℃保存。臨用前加入 3 ml 蒸餾水充分溶解。試劑四:粉劑×1 瓶,4℃保存。臨用前加入 2.5 ml 蒸餾水充分溶解。

試劑五:液體 15μl×1 瓶,4℃保存。臨用前加 3 ml 試劑二充分溶解。


具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)


自備儀器和用品:

研缽、冰、臺式離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、可調(diào)式移液槍和雙蒸水

粗酶液提?。?/span>

1. 組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(ml) 15~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1ml 試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿。8000g,4℃離心 10min,取上清置冰上待測。

2. . 細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104 個(gè)):試劑一體積(ml 500~10001 的比例(建議 500 萬細(xì)胞加入 1ml 試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,總時(shí)間 3min);8000g , 4℃離心 20min,取上清液置冰上混勻待測。

3. 血清等液體:直接測定。

MDHAR 測定操作:

1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30 min,調(diào)節(jié)波長到 340 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑二在 25℃水浴鍋中預(yù)熱 30 min

3. 依次在微量石英比色皿/96 孔板中加入 20μl 試劑三、20μl 試劑四、20μl 試劑五和 120μl 試劑二,最后加 20μl 上清液,迅速混勻后于 340nm 比色,記錄 30s  150s 的吸光值 30s  150s 的吸光值A1 A2,A=A1-A2

MDHAR 活性計(jì)算公式:

a. 使用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下

(1). 按蛋白濃度計(jì)算

MDHAR 活性單位定義:25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化 1nmol NADH  1 個(gè)酶活單位。

MDHAR (nmol/min /mg prot) = A÷ε÷d×V 反總×109Cpr×V ÷T

= 804×A ÷Cpr

(2). 按樣本質(zhì)量計(jì)算

MDHAR 活性單位定義:25℃中每克樣本每分鐘氧化 1nmol NADH  1U。 MDHAR (nmol/min /g 鮮重) = A÷ε÷d×V 反總×109W×V ÷V 樣總)÷T= 804×A ÷W

(3) 按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

MDHAR 活性單位定義:25℃中每 104 個(gè)細(xì)胞每分鐘氧化 1nmol NADH  1 個(gè)酶活單位。

MDHAR (nmol/min/104 cell) = A÷ε÷d×V 反總×109÷(細(xì)胞數(shù)量×V ÷V 樣總÷T

= 804×A ÷ 細(xì)胞數(shù)量

(4) 按液體體積計(jì)算

MDHAR 活性單位定義:25℃中每毫升液體每分鐘氧化 1nmol NADH  1 個(gè)酶活單位。

MDHAR (nmol/min /ml) = A÷ε÷d×V 反總×109÷V ÷T= 804×A

εNADH 摩爾消光系數(shù),6220 L/mol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V 反總:反應(yīng)體系總體積,0.2ml=2×10-4L V 樣:加入反應(yīng)體系中上清液體積,20μl=0.02mlV 樣總:提取液體積,1 ml;Cpr:上清液蛋白濃度, mg/ml,蛋白質(zhì)濃度需要另外測定,建議使用本公司蛋白質(zhì)含量BCA 試劑盒;W :樣品質(zhì)量;T:反應(yīng)時(shí)間,2min。

b. 使用 96 孔板測定的計(jì)算公式如下:

(1). 按蛋白濃度計(jì)算

MDHAR 活性單位定義:25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化 1nmol NADH  1 個(gè)酶活單位。

MDHAR (nmol/min /mg prot) = A÷ε÷d×V 反總×109Cpr×V ÷T

= 1608×A ÷Cpr

(2). 按樣本質(zhì)量計(jì)算

MDHAR 活性單位定義:25℃中每克樣本每分鐘氧化 1nmol NADH  1U。 MDHAR (nmol/min /g 鮮重) = A÷ε÷d×V 反總×109W×V ÷V 樣總)÷T= 1608×A ÷W

(3) 按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

MDHAR 活性單位定義:25℃中每 104 個(gè)細(xì)胞每分鐘氧化 1nmol NADH  1 個(gè)酶活單位。

MDHAR (nmol/min/104 cell) = A÷ε÷d×V 反總×109÷(細(xì)胞數(shù)量×V ÷V 樣總÷T

= 1608×A ÷ 細(xì)胞數(shù)量

(4) 按液體體積計(jì)算

MDHAR 活性單位定義:25℃中每毫升液體每分鐘氧化 1nmol NADH  1 個(gè)酶活單位。

MDHAR (nmol/min /ml) = A÷ε÷d×V 反總×109÷V ÷T

=1608×A

εNADH 摩爾消光系數(shù),6220 L/mol/cm;d96 孔板光徑,0.5cm;V 反總:反應(yīng)體系總體積,0.2ml=2×10-4L; V 樣:加入反應(yīng)體系中上清液體積,20μl=0.02ml;V 樣總:提取液體積,1 ml;Cpr:上清液蛋白濃度, mg/ml,蛋白質(zhì)濃度需要另外測定,建議使用本公司蛋白質(zhì)含量 BCA 試劑盒;W :樣品質(zhì)量;T:反應(yīng)時(shí)間,2min

注意事項(xiàng):

臨用前配制的試劑未使用完的 4℃保存,3 天內(nèi)使用完。

單脫氫抗壞血酸還原酶活性測定試劑盒




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