H2S 含量測(cè)定試劑盒說(shuō)明書(shū)

微量法 100T/96S

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義：

H2S 是一種新型氣態(tài)信號(hào)分子，存在于腦內(nèi)的神經(jīng)遞質(zhì)，生理濃度的H2S 對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)海馬的長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)功能具有重要的調(diào)節(jié)作用，并對(duì)自發(fā)性高血壓、出血性休克及肝硬化等疾病的過(guò)程發(fā)揮著重要的病理生理效應(yīng)。

測(cè)定原理：

H2S 與醋酸鋅、N, N-二甲基對(duì)苯二胺和硫酸鐵銨等反應(yīng)生成亞甲基藍(lán)，亞甲基藍(lán)在 665nm 處有最大吸收峰，通過(guò)測(cè)定其吸光值可計(jì)算H2S 含量。

H2S 含量測(cè)定試劑盒   信號(hào)系列-常備現(xiàn)貨

組成：

自備儀器和用品：

天平、低溫離心機(jī)、酶標(biāo)儀、96 孔板、蒸餾水。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)

樣品處理：

1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱(chēng)取約 0.1g 組織，加入 1ml 提取液）進(jìn)行冰浴勻漿，然后 10000g，4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。

2. 細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（10⁴ 個(gè)）：提取液體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬(wàn)細(xì)胞加入 1ml 提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時(shí)間 3min）；然后 10000g， 4℃，離心 10min，取上清置于冰上待測(cè)。

3. 血清（漿）：直接測(cè)定。

操作表：

1、酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 665nm。

2、操作表

H2S 含量計(jì)算公式：

用 96 孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)回歸方程為：y = 0.0022x，R2 = 0.9988

（1） 組織樣品

a.按照蛋白濃度計(jì)算

H2S（nmol/mg prot）= b.按照樣本重量計(jì)算 H2S（nmol/g 鮮重）=

(3) 細(xì)胞

H2S（nmol/10⁴ cell）=

ΔA ×V 反總÷(V 樣×Cpr)=681.8×ΔA÷Cpr

0.0022

ΔA ×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×W)= 681.8×ΔA÷W

0.0022

ΔA ×V 反總÷（V 樣÷V 樣總×細(xì)胞數(shù)量(萬(wàn)個(gè))）=681.8×ΔA÷細(xì)胞數(shù)量（萬(wàn)個(gè)）

0.0022

（2） 液體樣品H2S（nmol/ml）=

ΔA ×V 反總÷V 樣= 681.8×ΔA

0.0022

V 反總：反應(yīng)總體積，0.225ml；V 樣：反應(yīng)中樣品體積，0.15ml；V 樣總：加入提取液體積，1ml；W：樣品質(zhì)量，g；Cpr：蛋白濃度，mg/ml

注意事項(xiàng):zui低檢出限為 1nmol/ml。

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