TCEP溶液(0.5M,pH6.8)
- 公司名稱 上海雷根達(dá)科技有限公司
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- 更新時(shí)間 2025/5/11 23:39:00
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TCEP即TCEP-HCl，全稱Tris (2-carboxyethyl) phosphine hydrochloride，中文名為三(2-羧乙基)膦鹽酸鹽，分子式為C9H15O6P?HCl，分子量為286.65，CAS號(hào)51805-45-9。
Leagene TCEP溶液(0.5M,pH6.8)為 TCEP-HCl的水溶液配制而成，用NaOH調(diào)節(jié)pH值至6.8，常作為DTT的替代物用于蛋白上樣緩沖液和其它還原試劑的配制。在SDS-PAGE電泳中，一般終濃度在25mM左右的TCEP即可足夠還原蛋白樣品。TCEP有如下優(yōu)點(diǎn)：
無(wú)味----與DTT和β-巰基乙醇不同，TCEP無(wú)異味，助于創(chuàng)造健康的實(shí)驗(yàn)環(huán)境；
高效----5到50mM在數(shù)分鐘內(nèi)可還原大多數(shù)多肽或蛋白的二硫鍵(與DTT等效)；
特異----選擇性的還原甚至水溶液中的烷基化二硫鍵；
快速----在室溫和pH5.0的條件下，五分鐘內(nèi)即可還原蛋白的二硫鍵；
穩(wěn)定----耐空氣氧化，無(wú)揮發(fā)性，與蛋白的其它功能基團(tuán)不反應(yīng)；
通用----可在廣泛pH范圍、鹽、去垢劑、溫度條件下還原多肽和蛋白；
兼容----不含巰基，在多數(shù)應(yīng)用中不必去除還原試劑。
TCEP對(duì)還原二硫鍵選擇性，除半外，幾乎不會(huì)與其它氨基酸有反應(yīng)，并且能在更寬的pH值范圍包括酸性條件下使用，從而有效減少酰胺鍵的水解。TCEP的反應(yīng)活性溫和、易溶、毒性小，且更容易操作，在酸性、堿性溶液中的穩(wěn)定性都很好。
TCEP是一種高效、無(wú)異味、不含硫醇基的水溶性還原劑，可選擇性還原多肽或蛋白質(zhì)中的二硫鍵。TCEP具有更佳的穩(wěn)定性、更廣的兼容性、更強(qiáng)的還原性、更好的選擇性，而且由于不含巰基，因此在多數(shù)應(yīng)用中不必去除，從而廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)和分子生物學(xué)中，特別是在蛋白質(zhì)化學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)中，是的DTT的良好替代物。
TCEP使用范圍廣泛，無(wú)論是普通的SDS-PAGE中蛋白的還原，還是一些特殊的實(shí)驗(yàn)如固相金屬離子親和層析(IMAC)、質(zhì)譜、Ni柱純化等其它需要還原二硫鍵的實(shí)驗(yàn)，也特別適用于標(biāo)記蛋白純化、馬來(lái)酰亞胺偶聯(lián)半殘基反應(yīng)，它能夠預(yù)防半殘基形成二硫鍵，但不像DTT或β-巰基乙醇本身易與馬來(lái)酰亞胺反應(yīng)。
該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。
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