基于cIEF的蛋白等電點分析檢測技術(shù)服務詳情介紹

蛋白的等電點與其氨基酸序列和三維結(jié)構(gòu)密切相關，特定蛋白的等電點是固定的，因此可以通過比較不同dànbáizhì的等電點來研究它們的結(jié)構(gòu)和功能差異，jīngquè測定等電點是生物制品電荷異質(zhì)性表征的重要一環(huán)。

基于毛細管等電聚焦（cIEF）原理進行蛋白等電點分析是生物制品等電點檢測中zuì常使用的方法。該微分離技術(shù)的基本原理是在毛細管兩端加上直流電壓，管內(nèi)的載體兩性電解質(zhì)可以形成一定范圍的pH梯度，dànbáizhì依據(jù)其所帶電荷向陽極或陰極移動，直到凈電荷為0的某個pH值（即等電點pI）時停止，zuì終dànbáizhì聚焦成很窄的區(qū)段，從而達到分離的目的，并獲得該dànbáizhì的等電點信息。

基于cIEF進行蛋白等電點檢測，分析時間短、分辨率高、重復性好、jīngquè度高、樣本用量少，已經(jīng)成為多種氨基酸、多肽、重組蛋白、抗體及疫苗等生物制品研發(fā)與質(zhì)量控制中的關鍵技術(shù)之一。

百泰派克生物科技BTP通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認證；公司參照《中華人民共和國藥典》2020年版三部通則0542/四部通則0542毛細管電泳法，根據(jù)cIEF原理，建立了針對于不同類別生物制品的蛋白等電點檢測平臺，可實現(xiàn)蛋白、抗體、疫苗、多肽、重組膠原蛋白等生物制品等電點的jīngquè測定，也可以提供完整的包含方法學建立、驗證以及后續(xù)樣品檢測的整體服務。BTP還提供其他相關的服務，可點擊了解詳情。生物制品表征

實驗儀器

• BECKMAN COULTER PA800+毛細管電泳儀

技術(shù)應用

cIEF具有分析時間短，分辨率高、重復性好、jīngquè度高、樣本用量少等優(yōu)點。該方法已經(jīng)成為多種氨基酸、多肽、重組蛋白、抗體、疫苗等生物制品研發(fā)與質(zhì)量控制中的關鍵技術(shù)之一。

案例示意

實驗過程中，將樣品與兩性電解質(zhì)及5種標準的pI Marker混合，使用毛細管電泳儀檢測，在毛細管中電泳聚焦，根據(jù)5種內(nèi)標的保留時間，計算出供試品等電點。

圖1 pI marker結(jié)果

圖2 單抗樣品檢測結(jié)果

常見問答

問題1：為什么多數(shù)dànbáizhì的等電點是中性偏酸性？

回答：dànbáizhì是由氨基酸組成的，而大多數(shù)氨基酸等電點小于人體的pH（pH=7.4），故而大多數(shù)的dànbáizhì的等電點偏酸性，如山羊wèidànbáiméi等電點約為3。

問題2：有沒有等電點偏堿性的dànbáizhì？

回答：存在pI堿性的dànbáizhì。當dànbáizhì中的堿性氨基酸，如zǔānsuān，jīngānsuān、賴氨酸、比列較大，會導致等電點偏堿性，如yújīngdànbái等電點約為12。

問題3：做等電點檢測，兩種檢測方法如何選擇？

回答：基于cIEF的等電點檢測需要樣品具有280nm的紫外吸收；不具有280nm的紫外吸收的樣品（例如膠原蛋白）進行基于IEF的等電點檢測。

基于cIEF的蛋白等電點分析一站式服務

您只需下單-寄送樣品 百泰派克一站式服務完成：樣品處理-上機分析-數(shù)據(jù)分析-項目報告

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務，對蛋白序列進行分析。

※服務優(yōu)勢：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務，助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫(yī)學及高通量修飾組學等研究工作。

※服務優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標記方法，適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實驗結(jié)果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析，分析更系統(tǒng)準確。

三、單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進行單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標記物（通常是金屬元素標記的特異抗體）標記細胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細胞原理分離單個細胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個細胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細胞表面和內(nèi)部的信號分子表達量。

※服務優(yōu)勢：

1.技術(shù)優(yōu)良，*技術(shù)空白

采用金屬標記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題?？稍趩渭毎麑用嫔蠈Χ喾N指標同時進行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細胞，實現(xiàn)了數(shù)量級的提高，且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析，可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學優(yōu)質(zhì)服務商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務，支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎的CRO檢測分析服務；

2.獲國家CNAS實驗室認可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務；

3.業(yè)務范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺，滿足您一站式服務需求；

5.服務3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務!

基于cIEF的蛋白等電點分析檢測技術(shù)服務詳情介紹