基于cIEF的蛋白等電點分析檢測技術服務詳情介紹

蛋白的等電點與其氨基酸序列和三維結構密切相關，特定蛋白的等電點是固定的，因此可以通過比較不同dànbáizhì的等電點來研究它們的結構和功能差異，jīngquè測定等電點是生物制品電荷異質性表征的重要一環(huán)。

基于毛細管等電聚焦（cIEF）原理進行蛋白等電點分析是生物制品等電點檢測中zuì常使用的方法。該微分離技術的基本原理是在毛細管兩端加上直流電壓，管內的載體兩性電解質可以形成一定范圍的pH梯度，dànbáizhì依據(jù)其所帶電荷向陽極或陰極移動，直到凈電荷為0的某個pH值（即等電點pI）時停止，zuì終dànbáizhì聚焦成很窄的區(qū)段，從而達到分離的目的，并獲得該dànbáizhì的等電點信息。

基于cIEF進行蛋白等電點檢測，分析時間短、分辨率高、重復性好、jīngquè度高、樣本用量少，已經(jīng)成為多種氨基酸、多肽、重組蛋白、抗體及疫苗等生物制品研發(fā)與質量控制中的關鍵技術之一。

百泰派克生物科技BTP通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證；公司參照《中華人民共和國藥典》2020年版三部通則0542/四部通則0542毛細管電泳法，根據(jù)cIEF原理，建立了針對于不同類別生物制品的蛋白等電點檢測平臺，可實現(xiàn)蛋白、抗體、疫苗、多肽、重組膠原蛋白等生物制品等電點的jīngquè測定，也可以提供完整的包含方法學建立、驗證以及后續(xù)樣品檢測的整體服務。BTP還提供其他相關的服務，可點擊了解詳情。生物制品表征

實驗儀器

• BECKMAN COULTER PA800+毛細管電泳儀

技術應用

cIEF具有分析時間短，分辨率高、重復性好、jīngquè度高、樣本用量少等優(yōu)點。該方法已經(jīng)成為多種氨基酸、多肽、重組蛋白、抗體、疫苗等生物制品研發(fā)與質量控制中的關鍵技術之一。

案例示意

實驗過程中，將樣品與兩性電解質及5種標準的pI Marker混合，使用毛細管電泳儀檢測，在毛細管中電泳聚焦，根據(jù)5種內標的保留時間，計算出供試品等電點。

圖1 pI marker結果

圖2 單抗樣品檢測結果

常見問答

問題1：為什么多數(shù)dànbáizhì的等電點是中性偏酸性？

回答：dànbáizhì是由氨基酸組成的，而大多數(shù)氨基酸等電點小于人體的pH（pH=7.4），故而大多數(shù)的dànbáizhì的等電點偏酸性，如山羊wèidànbáiméi等電點約為3。

問題2：有沒有等電點偏堿性的dànbáizhì？

回答：存在pI堿性的dànbáizhì。當dànbáizhì中的堿性氨基酸，如zǔānsuān，jīngānsuān、賴氨酸、比列較大，會導致等電點偏堿性，如yújīngdànbái等電點約為12。

問題3：做等電點檢測，兩種檢測方法如何選擇？

回答：基于cIEF的等電點檢測需要樣品具有280nm的紫外吸收；不具有280nm的紫外吸收的樣品（例如膠原蛋白）進行基于IEF的等電點檢測。

基于cIEF的蛋白等電點分析一站式服務

您只需下單-寄送樣品 百泰派克一站式服務完成：樣品處理-上機分析-數(shù)據(jù)分析-項目報告

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進行分析，提供基于質譜的蛋白測序分析服務，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務，對蛋白序列進行分析。

※服務優(yōu)勢：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務，助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫(yī)學及高通量修飾組學等研究工作。

※服務優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標記物;

2.體內體外多種dànbáizhì標記方法，適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質譜分析靈敏度高，實驗結果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析，分析更系統(tǒng)準確。

三、單細胞質譜流式技術分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統(tǒng)進行單細胞質譜流式技術分析，采用金屬元素標記物（通常是金屬元素標記的特異抗體）標記細胞表面和內部的分子，然后用流式細胞原理分離單個細胞，再用電感耦合等離子體質譜（ICP-MS）分析單個細胞的原子質量譜，zuì后將原子質量譜數(shù)據(jù)轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。

※服務優(yōu)勢：

1.技術優(yōu)良，*技術空白

采用金屬標記抗體技術，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題?？稍趩渭毎麑用嫔蠈Χ喾N指標同時進行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右，而流式質譜技術一次（單樣本）就可分析至少10^5的細胞，實現(xiàn)了數(shù)量級的提高，且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規(guī)蛋白外，質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析，可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質譜技術，MALDI TOF，高效色譜分離技術，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質生物藥物分析服務，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質譜多組學優(yōu)質服務商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導原則，通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證，建立了完備的質量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術服務，支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質量控制體系，zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務；

2.獲國家CNAS實驗室認可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質量研究服務；

3.業(yè)務范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等；

4.七大質量控制檢測平臺，滿足您一站式服務需求；

5.服務3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質的生物質譜分析服務!

基于cIEF的蛋白等電點分析檢測技術服務詳情介紹