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用于去除 GST 標簽的 PreScission 蛋白酶

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 于Cytiva(思拓凡)

Cytiva(思拓凡) 和 Pall(頗爾)生命科學業(yè)務(wù)合并,攜手共同為研究人員和生物制藥企業(yè)提供廣泛多元的產(chǎn)品組合和專業(yè)的技術(shù)支持與服務(wù),推動創(chuàng)新療法從研發(fā)到商業(yè)化的發(fā)展。全新的Cytiva全面助力客戶提升工作質(zhì)量、速度與安全性,賦能創(chuàng)新型藥物的開發(fā)和生產(chǎn),惠及全球患者。合并后,Cytiva的產(chǎn)品品牌包括Allegro™,Supor™,iCELLis™ 和 Kleenpak™,以及ÄKTA™,Amersham™,Biacore™,F(xiàn)lexFactory™,HyClone™,MabSelect™,Sefia™,Whatman™ 和 Xcellerex™。

生命科學

PreScission 蛋白酶是人鼻病毒 (HRV) 3C 蛋白酶和 GST 的融合蛋白??梢徊酵瓿?GST 標簽的層析柱上裂解和蛋白純化。
  • 識別 LeuGluValLeuPheGln/GlyPro 序列并在Gln 殘基與 Gly 殘基之間進行特異性酶切。
  • 省時——可以酶切 GST 標簽蛋白,同時仍與親和層析填料結(jié)合。
  • 孵育溫度低——能夠低溫酶切包含 HRV 3C 蛋白酶識別序列的融合蛋白。

層析柱上或?qū)游鲋饷噶呀?/h2>

當融合蛋白仍與 Glutathione Sepharose 4B、Glutathione Sepharose High Performance 或 Glutathione Sepharose 4 Fast Flow 親和層析填料結(jié)合時,只需一步即可去除 GST 標簽和蛋白酶。另一個選擇是使用還原型洗脫帶 GST 標簽的蛋白質(zhì),裂解,然后使樣品通過相同的層析填料以去除蛋白酶和標簽。

與其他常規(guī)蛋白酶(例如和 Xa 因子)不同,這種帶 GST 標簽的融合蛋白可以通過結(jié)合對 GST 具有親和力的層析填料而輕松去除。其他非重組蛋白質(zhì)酶需要使用不同的層析填料進行額外的純化步驟。

編碼 HRV 3C 蛋白酶識別序列的載體

pGEX-6P 載體 pGEX-6P-1、pGEX-6P-2 和 pGEX-6P-3 編碼此 3C 蛋白酶的識別序列。

成功用于已發(fā)表研究

PreScission 蛋白酶在多種研究應(yīng)用中用于執(zhí)行酶切,包括:

  • 泛素化蛋白中所涉及蛋白的層析柱上裂解和純化
  • 從包涵體中對帶 GST 標簽的蛋白質(zhì)進行裂解和純化,用以研究丙型肝炎病毒離子通道復(fù)合物的形成


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