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利什曼原蟲AB抗體ELISA法診斷試劑盒

廣州健侖生物科技有限公司

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利什曼原蟲AB抗體ELISA法診斷試劑盒

試驗原理

間接法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知 LSM-Ab 濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將 LSM-Ab 和標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親

和素標(biāo)記過的 HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物 A、B，和酶結(jié)合物同時作

用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中 LSM-Ab 的濃度呈比例關(guān)系。

自備材料

蒸餾水。

加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性

避免直接接觸終止液和底物 A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。

實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

操作注意事項

試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物 A、B 液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。

使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

底物 A 應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物 B 對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實

驗完成后應(yīng)立即讀取 OD 值。

加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。

按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

樣品收集、處理及保存方法

血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g 離心 10 分鐘

將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g 離心 30 分鐘去除顆粒。

細(xì)胞上清液---1000×g 離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。

保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血

脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在 37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并

確保樣品均勻地充分解凍。

試劑的準(zhǔn)備

標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備，不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。

洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水 50 倍稀釋。

操作步驟

使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤

差。

根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自

己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。

加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品 50ul 于反應(yīng)孔、加入待測樣品 50ul 于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入 50ul 的標(biāo)記的抗體。

蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育 1 小時。

甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩 30 秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作 3 次。如果用洗板機(jī)

洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

每孔加入 80ul 的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育 30 分鐘。

甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩 30 秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作 3 次。如果用洗板機(jī)

洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

每孔加入底物 A、B 各 50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育 10 分鐘。避免光照。

取出酶標(biāo)板，迅速加入 50ul 終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。

在 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。

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墨西哥利什曼原蟲 IgG kit
杜氏利什曼原蟲 IgG kit
隱孢子蟲/賈第蟲抗原直間接免疫熒光檢測試劑盒
隱孢子蟲抗原直接免疫熒光檢測試劑盒
犬利氏曼原蟲 IgG ELISA kit
泛瘧抗原（pLDH) ELISA kit
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惡性瘧原蟲抗原（HRP2)ELISA kit
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溶組織內(nèi)阿米巴抗原ELISA kit
賈地蟲抗原ELISA kit
絲蟲 IgG ELISA kit
犬弓蛔蟲 IgG ELISA kit
克氏錐蟲IgG ELISA kit

利什曼原蟲抗體定性檢測試劑（黑熱?。?/span>

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