高通量基因敲除技術藥物篩選和靶點鑒定檢測技術服務詳情介紹

藥物發(fā)現(xiàn)的關鍵步驟是靶點識別——即發(fā)現(xiàn)“可成藥”的生物靶點，在確定靶點后，還必須對其進行驗證以證明靶點與疾病表型之間的功能關系，同時確保安全性。藥物發(fā)現(xiàn)的過程漫長且昂貴，但良好的靶點驗證將提高開發(fā)有效藥物并zuì終在臨床取得成功的可能性。CRISPR-Cas9基因編輯技術的zuì新發(fā)展對藥物發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生了巨大影響，研究人員能夠有意激活或抑制基因，以闡明和了解那些在疾病進展中發(fā)揮作用的細胞途徑。它還可用于創(chuàng)建準確的模型，以更好地研究疾病表型并篩選小分子以快速識別眾多潛在目標。

一旦識別出這些潛在的靶點，就可以利用質譜技術來研究潛在藥物分子與其靶標dànbáizhì或代謝產(chǎn)物之間的相互作用，揭示藥物如何與其靶點結合，以及這種結合如何影響細胞內的信號傳遞和代謝途徑。通過結合高通量基因敲除技術和質譜分析，研究人員不僅可以快速地識別新的藥物靶點，還能深入理解藥物的作用機制，從而設計出更有效、更安全的治療方法。

高通量基因敲除在藥物發(fā)現(xiàn)中的應用

百泰派克生物科技（BTP）基于高通量基因敲除技術，結合高通量質譜平臺，可以為您提供從基因敲除到藥物靶點鑒定的一站式解決方案。我們優(yōu)化的CRISPR/Cas9系統(tǒng)可實現(xiàn)人/小鼠細胞系、原代細胞、免疫細胞及iPS細胞的單/多基因敲除、移碼突變和大序列敲除。BTP自建7大檢測平臺，擁有CNAS/ISO9001雙重質量體系認證實驗室，旨在為您提供zuì優(yōu)質的科研服務，我們期待與您的合作，歡迎免費聯(lián)系我們，了解更多服務詳情！

服務優(yōu)勢

1）敲除效率保證：優(yōu)化的CRISPR/Cas9系統(tǒng)，超過80%靶點敲除效率在70%；基因敲除后，我們采用Sanger測序和深度dànbáizhì組學技術對敲除效率進行雙驗證，雙重保障數(shù)據(jù)的真實性。

2）多種基于靶標的藥物靶點鑒定平臺：我們依托高分辨質譜平臺，結合親和層析技術以及活性位點定向探針等技術，開發(fā)并驗證了多種基于靶標的藥物靶點鑒定平臺，可滿足不同的科研需求。

3）項目周期短：在進行基因敲除實驗前，我們會對不同細胞中基因必要性及表達量進行分析，確保實驗的可行性，降低實驗失敗風險；且無需針對客戶的靶點設計預實驗進行gRNA驗證，大大縮短了項目周期。

4）一站式服務：BTP擁有豐富的組學服務經(jīng)驗以及zhuānyè的技術人員，可以根據(jù)您的需求定制zuì優(yōu)的項目方案，您只需將您的實驗目的告訴我們并寄送樣品，BTP負責所有項目后續(xù)，包括樣品處理、實驗分析、數(shù)據(jù)分析和項目報告。

應用案例

1.全基因組 CRISPR-cas9 敲除篩選結合質譜技術確定 KRAS 突變結腸癌 MEK 抑制劑耐藥性靶點

靶向 KRAS 通路是治療結直腸癌（CRC）非常有前景的方法，但結直腸癌細胞能夠耐受 MEK 抑制劑，使得 MEK 抑制劑在 CRC 患者中的臨床試驗結果不盡人意。因此，作者 在 MEK 抑制劑存在的情況下進行全基因組 CRISPR/Cas9 篩選，以鑒定在含有 KRAS 突變的 CRC 模型中通過 MEK 抑制而綜合致死的基因。結果表明，GRB7 通過 RTK 途徑使 CRC 細胞對 MEK 抑制劑產(chǎn)生主要耐藥性。 GRB7 免疫沉淀物的質譜分析表明 PLK1 是 GRB7 的主要相互作用激酶。PLK1 和 MEK 抑制劑的組合在體外和體內協(xié)同抑制 CRC 細胞增殖并誘導細胞凋亡。zuì終，作者確定 GRB7-PLK1 是介導 RTK 的樞軸，導致 MEK 抑制劑耐受。該研究表明，在攜帶 KRAS 突變的 CRC 患者的臨床治療中，PLK1 是協(xié)同 MEK 抑制劑的一個有前景的靶點。

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圖1. CRISPR 文庫篩選，確定 RTK 通路參與 KRAS 突變結腸癌細胞的 MEK抑制劑耐藥性

2.利用 CRISPR 高通量篩選下一代候選藥物

jífēitìní和厄洛替尼是治療非小細胞肺癌的有效藥物，它們以表皮生長因子受體（EGFR）為治療靶點，但是 EGFR 的獲得性突變 C797S 阻止藥物與 EGFR làoānsuān激酶結構域靶位點相互作用，使患者對這些藥物治療表現(xiàn)出耐藥性。阿斯利康（Astra Zeneca）使用CRISPR-Cas9高通量基因敲除技術在癌細胞系中創(chuàng)建了jīngquè的 C797S 突變， C797S 細胞系模型的應用使藥物篩選能夠識別針對這種新突變的下一代化合物。

Thress, K., et al. Nat Med.

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圖2. 獲得性EGFR C797S突變介導的AZD9291獲得性耐藥性

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進行分析，提供基于質譜的蛋白測序分析服務，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務，對蛋白序列進行分析。

※服務優(yōu)勢：

1.采用目前世界上先進的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務，助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫(yī)學及高通量修飾組學等研究工作。

※服務優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標記物;

2.體內體外多種dànbáizhì標記方法，適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質譜分析靈敏度高，實驗結果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析，分析更系統(tǒng)準確。

三、單細胞質譜流式技術分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統(tǒng)進行單細胞質譜流式技術分析，采用金屬元素標記物（通常是金屬元素標記的特異抗體）標記細胞表面和內部的分子，然后用流式細胞原理分離單個細胞，再用電感耦合等離子體質譜（ICP-MS）分析單個細胞的原子質量譜，zuì后將原子質量譜數(shù)據(jù)轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。

※服務優(yōu)勢：

1.技術先進，填補技術空白

采用金屬標記抗體技術，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右，而流式質譜技術一次（單樣本）就可分析至少10^5的細胞，實現(xiàn)了數(shù)量級的提高，且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規(guī)蛋白外，質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析，可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質譜技術，MALDI TOF，高效色譜分離技術，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質生物藥物分析服務，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質譜多組學優(yōu)質服務商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導原則，通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證，建立了完備的質量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術服務，支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質量控制體系，zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務；

2.獲國家CNAS實驗室認可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質量研究服務；

3.業(yè)務范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等；

4.七大質量控制檢測平臺，滿足您一站式服務需求；

5.服務3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質的生物質譜分析服務!

高通量基因敲除技術藥物篩選和靶點鑒定檢測技術服務詳情介紹