肽圖工作流程檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹

肽圖工作流程主要是通過(guò)對(duì)目標(biāo)dànbáizhì或抗體進(jìn)行酶解、分離和質(zhì)譜分析，構(gòu)建特定的肽圖譜以解析分子結(jié)構(gòu)、翻譯后修飾及變異信息得過(guò)程。這yìliú程是dànbáizhì結(jié)構(gòu)表征和質(zhì)量控制的重要手段，在藥物開(kāi)發(fā)、生物標(biāo)志物研究以及工藝優(yōu)化中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。

一、基本步驟

肽圖工作流程通常包括樣品制備、酶切處理、分離分析、質(zhì)譜檢測(cè)和數(shù)據(jù)解析五大核心步驟。每一步驟的jīngquè執(zhí)行都對(duì)zuì終的肽圖結(jié)果產(chǎn)生直接影響。

1、樣品制備

肽圖工作流程的dìyī步是樣品制備。dànbáizhì或抗體樣品通常來(lái)源于細(xì)胞培養(yǎng)液、血清或純化樣品。為確保分析的準(zhǔn)確性，需要對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理，包括去除雜質(zhì)、濃縮和緩沖液更換等操作。樣品制備的質(zhì)量直接關(guān)系到后續(xù)步驟的酶切效率和分離效果。

2、酶切處理

酶切是肽圖工作的核心環(huán)節(jié)之一，目的是將dànbáizhì切割成特定長(zhǎng)度的肽段。常用的酶切工具是yídànbáiméi，其能夠在賴(lài)氨酸和jīngānsuān殘基后特異性切割dànbáizhì。為提高酶切效率，樣品通常需要經(jīng)過(guò)變性、還原和烷基化處理。這些步驟可以打開(kāi)dànbáizhì的gāojí結(jié)構(gòu)，使酶更容易接觸其切割位點(diǎn)。

3、分離分析

酶切后形成的肽段混合物通常復(fù)雜且含量跨度大，因此需要通過(guò)分離技術(shù)進(jìn)行預(yù)處理。反相高效液相色譜（RP-HPLC）是zuì常用的分離手段，能夠根據(jù)肽段的疏水性差異對(duì)其進(jìn)行分離。對(duì)于復(fù)雜樣本，可以采用二維液相色譜技術(shù)（如強(qiáng)陽(yáng)離子交換結(jié)合反相色譜）進(jìn)一步提升分離能力。分離過(guò)程直接決定了質(zhì)譜分析的信號(hào)強(qiáng)度和譜圖清晰度。

4、質(zhì)譜檢測(cè)

質(zhì)譜檢測(cè)是肽圖工作流程中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，通過(guò)高分辨率質(zhì)譜儀對(duì)肽段的質(zhì)荷比（m/z）進(jìn)行jīngzhǔn測(cè)量，從而獲取肽段的一級(jí)質(zhì)譜信息。質(zhì)譜儀還可以通過(guò)二級(jí)碎裂（MS/MS）生成肽段的序列信息，用于確認(rèn)氨基酸排列和修飾位置。

質(zhì)譜檢測(cè)通常采用在線(xiàn)液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS/MS）的方式，結(jié)合數(shù)據(jù)依賴(lài)采集（DDA）或數(shù)據(jù)獨(dú)立采集（DIA）模式，以實(shí)現(xiàn)高靈敏度和全面覆蓋的肽段分析。現(xiàn)代質(zhì)譜儀如Orbitrap和Q-TOF具有jígāo的分辨率和質(zhì)量精度，能夠滿(mǎn)足復(fù)雜樣本的分析需求。

5、數(shù)據(jù)解析

質(zhì)譜檢測(cè)生成的大量數(shù)據(jù)需要經(jīng)過(guò)zhuānyè軟件進(jìn)行解析。通過(guò)與參考序列或dànbáizhì數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)，可以確定肽段的來(lái)源、翻譯后修飾位置及變異信息。常用的數(shù)據(jù)分析工具包括MaxQuant、Proteome Discoverer和Mascot等。這一步不僅對(duì)肽圖譜進(jìn)行解讀，還提供修飾定量和雜質(zhì)鑒定等信息，為后續(xù)研究提供重要支持。

二、應(yīng)用價(jià)值

肽圖工作流程廣泛應(yīng)用于dànbáizhì組學(xué)研究和生物制藥領(lǐng)域。在藥物開(kāi)發(fā)中，肽圖分析是生物制品質(zhì)量控制的重要工具，用于監(jiān)測(cè)抗體藥物的糖基化、脫酰胺和裂解等修飾狀態(tài)。在結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究中，它可以幫助解析dànbáizhì的gāojí結(jié)構(gòu)和復(fù)合物構(gòu)象。

此外，該流程還可用于工藝優(yōu)化和穩(wěn)定性研究。例如，在藥物儲(chǔ)存和運(yùn)輸過(guò)程中，dànbáizhì可能發(fā)生化學(xué)降解或聚集，通過(guò)肽圖分析可以jīngzhǔn定位這些問(wèn)題并評(píng)估其影響。

三、技術(shù)挑戰(zhàn)與改進(jìn)方向

盡管該技術(shù)在理論上較為成熟，實(shí)際應(yīng)用中仍存在技術(shù)挑戰(zhàn)。復(fù)雜樣本中肽段的動(dòng)態(tài)范圍寬、高豐度信號(hào)易掩蓋低豐度肽段、翻譯后修飾的多樣性等問(wèn)題都對(duì)分析技術(shù)提出了更高的要求。此外，數(shù)據(jù)解析過(guò)程可能受到譜圖質(zhì)量和數(shù)據(jù)庫(kù)完整性的限制。

為克服這些難題，近年來(lái)出現(xiàn)了多項(xiàng)技術(shù)改進(jìn)。更高效的酶切策略、更靈敏的質(zhì)譜儀器以及結(jié)合人工智能的數(shù)據(jù)解析工具正推動(dòng)其向更加高效、jīngzhǔn和高通量的方向發(fā)展。

百泰派克生物科技在肽圖工作流程的研究和應(yīng)用方面具有豐富的經(jīng)驗(yàn)，致力于為客戶(hù)提供全流程的zhuānyè服務(wù)。從樣品制備到數(shù)據(jù)解析，我們依托*的質(zhì)譜平臺(tái)和zīshēn的技術(shù)團(tuán)隊(duì)，確保每一環(huán)節(jié)的高質(zhì)量執(zhí)行。無(wú)論是在基礎(chǔ)研究還是工業(yè)應(yīng)用中，百泰派克都能為您提供zhuóyuè的解決方案，助力科學(xué)研究和藥物開(kāi)發(fā)的持續(xù)突破！

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一、蛋白測(cè)序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測(cè)序系統(tǒng)對(duì)dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測(cè)序分析服務(wù)，包括對(duì)dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對(duì)于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測(cè)序法的dànbáizhì從頭測(cè)序服務(wù)，對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.采用目前世界上*的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測(cè)定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測(cè)定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測(cè);

6.測(cè)序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué)、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測(cè)較低豐度蛋白，線(xiàn)性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.技術(shù)*，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問(wèn)題?？稍趩渭?xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測(cè)51個(gè)目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測(cè)細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專(zhuān)有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過(guò)我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測(cè)平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測(cè)和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過(guò)CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤，為客戶(hù)提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測(cè)分析服務(wù)；

2.獲國(guó)家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶(hù)提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測(cè)平臺(tái)，滿(mǎn)足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶(hù)的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

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