細(xì)胞培養(yǎng)中氨基酸穩(wěn)定同位素標(biāo)記檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹

細(xì)胞培養(yǎng)中氨基酸穩(wěn)定同位素標(biāo)記（Stable Isotope Labeling by Amino acids in Cell culture，簡(jiǎn)稱SILAC）是一種基于代謝同位素內(nèi)源性整合原理的dànbáizhì定量分析技術(shù)。該方法通過(guò)在細(xì)胞培養(yǎng)基中添加含有穩(wěn)定同位素標(biāo)記的氨基酸，如[^13C6]-賴氨酸或[^13C6^15N_4]-jīngānsuān使得細(xì)胞在生長(zhǎng)過(guò)程中自然將這些標(biāo)記氨基酸摻入合成的dànbáizhì中，從而在質(zhì)譜分析中形成可區(qū)分的“輕”和“重”肽段。這種內(nèi)源性標(biāo)記方式無(wú)需化學(xué)修飾、樣品間誤差小，能夠?qū)崿F(xiàn)高精度的相對(duì)定量，是細(xì)胞水平dànbáizhì組差異分析中的經(jīng)典策略。相比其他dànbáizhì定量策略，細(xì)胞培養(yǎng)中氨基酸穩(wěn)定同位素標(biāo)記具備顯著技術(shù)優(yōu)勢(shì)。首先，其定量精度高，避免了化學(xué)標(biāo)記過(guò)程中可能引入的反應(yīng)效率差異。其次，樣品混合前的wánquán同位素替代保證了樣本間的一致處理，極大降低了系統(tǒng)誤差。此外，由于標(biāo)記在代謝層面進(jìn)行，細(xì)胞培養(yǎng)中氨基酸穩(wěn)定同位素標(biāo)記可用于追蹤dànbáizhì合成與降解速率，支持動(dòng)態(tài)蛋白組學(xué)分析。這些特性使其成為細(xì)胞模型中進(jìn)行表型關(guān)聯(lián)研究、藥物作用機(jī)制研究以及干預(yù)效應(yīng)評(píng)估的理想技術(shù)平臺(tái)。

細(xì)胞培養(yǎng)中氨基酸穩(wěn)定同位素標(biāo)記的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)通常涉及兩組或多組細(xì)胞：一組在“輕”培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，含天然氨基酸，另一組在“重”培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，含有相應(yīng)的穩(wěn)定同位素標(biāo)記氨基酸。細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間需覆蓋足夠的倍增周期（通常為5–7代）以確保細(xì)胞內(nèi)大部分dànbáizhì均由標(biāo)記氨基酸構(gòu)成。完成標(biāo)記后將不同處理組細(xì)胞裂解、等量混合，并共同進(jìn)行蛋白提取、酶解和液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS/MS）分析。在質(zhì)譜圖中，標(biāo)記肽段相對(duì)于未標(biāo)記肽段表現(xiàn)為一定質(zhì)量偏移，通過(guò)計(jì)算相對(duì)豐度即可得到準(zhǔn)確的定量信息。細(xì)胞培養(yǎng)中氨基酸穩(wěn)定同位素標(biāo)記的zuì大優(yōu)勢(shì)在于標(biāo)記步驟發(fā)生在細(xì)胞生理過(guò)程中，不影響dànbáizhì結(jié)構(gòu)和功能，能zuì大程度還原生物學(xué)真實(shí)性。

盡管細(xì)胞培養(yǎng)中氨基酸穩(wěn)定同位素標(biāo)記具有許多優(yōu)勢(shì)，但其應(yīng)用仍存在一定局限。例如，它主要適用于可在培養(yǎng)基中長(zhǎng)期穩(wěn)定生長(zhǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞系，不適用于初代細(xì)胞或組織樣本。此外，標(biāo)記效率與細(xì)胞代謝活性相關(guān)，需在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中嚴(yán)格控制標(biāo)記周期和氨基酸濃度。對(duì)于含有大量未能被wánquán標(biāo)記的低豐度蛋白，質(zhì)譜分析仍需依賴高靈敏度設(shè)備及優(yōu)化的數(shù)據(jù)庫(kù)搜索策略以確保數(shù)據(jù)可靠性。

百泰派克生物科技依托zhuānyè的dànbáizhì組平臺(tái)與成熟的質(zhì)譜分析經(jīng)驗(yàn)，為科研客戶提供高標(biāo)準(zhǔn)的基于SILAC/Dimethyl標(biāo)記的定量蛋白組分析服務(wù)，包括實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、樣本處理、數(shù)據(jù)采集與深度解讀。

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一、蛋白測(cè)序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測(cè)序系統(tǒng)對(duì)dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測(cè)序分析服務(wù)，包括對(duì)dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對(duì)于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測(cè)序法的dànbáizhì從頭測(cè)序服務(wù)，對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.采用目前世界上*的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測(cè)定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測(cè)定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測(cè);

6.測(cè)序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、蛋白zhìzǔxué

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC，提供定量蛋白zhìzǔxué、bǎxiàngdàn白zhìzǔxué、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種蛋白zhìzǔxué分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白zhìzǔxué服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測(cè)較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.技術(shù)*，填補(bǔ)技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問(wèn)題?？稍趩渭?xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測(cè)51個(gè)目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測(cè)細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過(guò)我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測(cè)平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測(cè)和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過(guò)CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測(cè)分析服務(wù)；

2.獲國(guó)家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋蛋白zhìzǔxué、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測(cè)平臺(tái)，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

細(xì)胞培養(yǎng)中氨基酸穩(wěn)定同位素標(biāo)記檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹