雌酮（Estrone）檢測(cè)試劑盒

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：雌酮檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

英文名稱：Estrone ELISA

【產(chǎn)品規(guī)格】

96T

【預(yù)期用途】

Estrone雌酮激素檢測(cè)試劑盒可用于定量檢測(cè)血清或EDTA-血漿中的雌酮。

【前言簡(jiǎn)介】

女性體內(nèi)有雌激素有三種形式：雌酮（E1）、雌二醇（E2）和雌三醇(E3）。雌激素參與女性性器官的發(fā)育和次要性特征，并影響大多數(shù)器官系統(tǒng)，包括大腦、乳房、心血管（心臟和血管系統(tǒng)）、免疫、生殖（卵巢和子宮）、膀胱、皮膚和骨骼。雌酮主要由雄烯二酮產(chǎn)生。在絕經(jīng)前的婦女中，超過50%的雌激素是由卵巢分泌的。在青春期前兒童、男性和絕經(jīng)后婦女中，雌酮的主要部分來源于外周組織轉(zhuǎn)化。在月經(jīng)周期的卵泡期，雌酮水平在第14天左右達(dá)到峰值，隨后下降。在黃體期的第二個(gè)高峰出現(xiàn)在該周期的第21天左右。這些雌酮濃度的變化反映了雌二醇的水平。該試驗(yàn)可用于監(jiān)測(cè)絕經(jīng)后婦女的低劑量女性激素替代治療，監(jiān)測(cè)抗雌激素治療（如芳香化酶抑制劑），并作為絕經(jīng)后婦女骨折風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的臨床評(píng)估、影像學(xué)研究和骨密度測(cè)量的輔助手段。此外，它還可以作為診斷和檢查女性性早熟和青春期延遲（男性的程度較輕），以及疑似性類固醇代謝紊亂（如芳香化酶缺乏和17-羥化酶缺乏）的一部分。

【檢測(cè)原理】

Estrone雌酮激素檢測(cè)試劑盒基于酶聯(lián)免疫競(jìng)爭(zhēng)法原理。微孔板上包被了針對(duì)雌酮分子抗原位點(diǎn)的兔多克隆抗體，樣本中存在的內(nèi)源性雌酮和辣根過氧化物酶-雌酮共軛物競(jìng)爭(zhēng)與包被抗體結(jié)合。孵育后通過洗滌除去未結(jié)合的材料。辣根過氧化物酶的結(jié)合量與樣本中雌酮的濃度成反比。加入底物液后，顏色強(qiáng)度與樣本中雌酮的濃度成反比。

【試劑盒組成成分】

1. 微孔板：      12x8，包被抗雌酮抗體（多克隆）

2. 標(biāo)準(zhǔn)品0-6：   7x1mL，0-15-30-90-270-810-2400pg/mL，即用型（pg/mL x 3.69=pmol/L）

3. 高低質(zhì)控：    2x1mL，即用型

4. 酶聯(lián)物：      1x14mL，辣根過氧化物酶-雌酮共軛物，即用型

5. 底物液：      1x14mL，即用型

6. 終止液：      1x14mL，即用型

7. 洗滌液：      1x30mL，40X濃縮

實(shí)驗(yàn)所需材料但試劑盒未提供

1. 酶標(biāo)儀

2.校準(zhǔn)的可調(diào)精密移液器

3. 吸水紙

4. 去離子水或雙蒸水

5. 計(jì)時(shí)器

6. 半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙或數(shù)據(jù)處理軟件

【儲(chǔ)存條件】

未開封試劑可在2-8℃下保存至有效期，不要使用過期的試劑

開封后的試劑必須儲(chǔ)存在2-8℃下，微孔板必須儲(chǔ)存于2-8℃下，一旦打開密封袋，必須立即再次密封

開封后的試劑在上述條件下可儲(chǔ)存2周

【試劑制備】

所有試劑使用前需平衡至室溫（21-24℃）

洗滌液

用蒸餾水稀釋洗滌濃縮液

例如，30mL洗滌濃縮液+1170mL蒸餾水至最終體積為1200mL，混合均勻

稀釋后的洗滌液在室溫下可穩(wěn)定儲(chǔ)存2周

【樣本收集和制備】

血清：靜脈穿刺采血，等待凝集，室溫離心獲得血清。未凝集前不要離心。

血漿：將全血直接采集至含有抗凝劑的離心管內(nèi)，離心。

樣本儲(chǔ)存

樣本采集后蓋好蓋子，2-8℃下可保存5天，如果想保存更長(zhǎng)時(shí)間（18個(gè)月），則可凍存于-20℃，僅可冷凍1次。實(shí)驗(yàn)前，樣本解凍后要使其混勻。

檢測(cè)步驟

每次試驗(yàn)都應(yīng)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線

1. 取出所需微孔板數(shù)量并固定在支架上

2. 將25µL的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣本加入相應(yīng)的孔中

3. 將100µL酶聯(lián)物加入每個(gè)孔中，混合10秒

4. 在室溫下孵育60分鐘

5. 棄去孔中內(nèi)容物，每孔用400µL洗滌液清洗微孔板5次，最后一次洗滌后，在吸水紙上拍打微孔板以除去殘留液體

6. 將100µL底物液加入每個(gè)孔中

7. 在室溫下孵育15分鐘

8. 將100µL終止液加入每個(gè)孔中

9. 加入終止液后10分鐘內(nèi)測(cè)量450±10nm處的吸光度

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