劃痕(修復)實驗服務

細胞劃痕實驗服務原理

將細胞培養(yǎng)，觀察細胞向無細胞的劃痕區(qū)域遷移情況，來判斷細胞的遷移能力

實驗服務目的

細胞劃痕法檢測細胞的遷移能力

實驗儀器

超凈工作臺、CO2培養(yǎng)箱、生物倒置顯微鏡、6孔板(其他的也可以,但感覺6孔比較好,大小適中)、marker筆、直尺20、 微升槍頭(滅菌)、無血清培養(yǎng)基、 PBS

實驗準備

所有能滅菌的器械都要滅菌，直尺和marker筆在操作前紫外照射30min (超凈臺內(nèi))

實驗流程

1.先用marker筆在6孔板背后，用直尺比著，均勻得劃橫線，大約每隔0.5~1cm-道，橫穿過孔。每孔至 少穿過5條線。

2在空中加入約5X105個細胞，具體數(shù)量因細胞不同而不同，掌握為過夜能鋪滿。

3.第二天用槍頭比著直尺，盡量垂至于背后的橫線劃痕，槍頭要垂直,不能傾斜。

4.用PBS洗細胞3次，處劃下的細胞，加入無血清培養(yǎng)基。

5.放入37度5%CO2培養(yǎng)箱，培養(yǎng)。按0，6, 12, 24小時取樣，拍照。

細胞劃痕實驗服務內(nèi)容與方法

1、使用marker筆在6孔板背后，均勻得劃橫線，大約每隔0.5-1cm一道，橫穿過孔。每孔至少穿過5條

2、在孔中加入約5*105個細胞，具體數(shù)量因細胞不同而不同，掌握為過夜能鋪滿。

3、第二天用槍頭比著直尺，盡量垂至于背后的橫線劃痕，槍頭要垂直,不能傾斜。

4、用PBS洗細胞3次，去除劃下的細胞，加入無血清培養(yǎng)基。

5、放入37度5%co2培養(yǎng)箱，培養(yǎng)。按0，6, 12, 24小時取樣，拍照。

細胞劃痕實驗服務內(nèi)容與方法

1、使用marker筆在6孔板背后，均勻得劃橫線，大約每隔0.5-1cm- 道，橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。

2、在孔中加入約5*105個細胞，具體數(shù)量因細胞不同而不同，掌握為過夜能鋪滿。

3、第二天用槍頭比著直尺，盡量垂至于背后的橫線劃痕，槍頭要垂直， 不能傾斜。

4、用PBS洗細胞3次，去除劃下的細胞，加入無血清培養(yǎng)基。

5、放入37度5%co2培養(yǎng)箱, 培養(yǎng)。按0, 6, 12， 24小時取樣，拍照。

細胞劃痕實驗服務信息(客戶提供)

1、生長狀況良好的細胞株，一并提供細胞特性, 培養(yǎng)條件及相關(guān)注意事項。

2、受試樣品及相關(guān)信息

細胞劃痕服務服務周期：2周

細胞劃痕實驗結(jié)果提交

提交實驗報告書(實驗材料、實驗過程、結(jié)果分析、原始數(shù)據(jù)、細胞圖片等)。

下面是照片，細胞NIH3T3

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