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凝膠色譜法的原理

閱讀：23317 發(fā)布時(shí)間：2019-11-12

　　凝膠色譜法又叫凝膠色譜技術(shù)，是六十年代初發(fā)展起來的一種快速而又簡(jiǎn)單的分離分析技術(shù)，由于設(shè)備簡(jiǎn)單、操作方便，不需要有機(jī)溶劑，對(duì)高分子物質(zhì)有很高的分離效果。凝膠色譜法又稱分子排阻色譜法。

　　什么是凝膠色譜法

　　凝膠色譜法又叫凝膠色譜技術(shù)，是六十年代初發(fā)展起來的一種快速而又簡(jiǎn)單的分離分析技術(shù)，由于設(shè)備簡(jiǎn)單、操作方便，不需要有機(jī)溶劑，對(duì)高分子物質(zhì)有很高的分離效果。凝膠色譜法又稱分子排阻色譜法。凝膠色譜法主要用于高聚物的相對(duì)分子質(zhì)量分級(jí)分析以及相對(duì)分子質(zhì)量分布測(cè)試。根據(jù)分離的對(duì)象是水溶性的化合物還是有機(jī)溶劑可溶物，又可分為凝膠過濾色譜(GFC)和凝膠滲透色譜(GPC)。GFC一般用于分離水溶性的大分子，如多糖類化合物。凝膠的代表是葡萄糖系列，洗脫溶劑主要是水。凝膠滲透色譜法主要用于有機(jī)溶劑中可溶的高聚物(聚苯乙烯、聚氯已烯、聚乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯等)相對(duì)分子質(zhì)量分布分析及分離，常用的凝膠為交聯(lián)聚苯乙烯凝膠，洗脫溶劑為四氫呋喃等有機(jī)溶劑。凝膠色譜不但可以用于分離測(cè)定高聚物的相對(duì)分子質(zhì)量和相對(duì)分子質(zhì)量分布，同時(shí)根據(jù)所用凝膠填料不同，可分離油溶性和水溶性物質(zhì)，分離相對(duì)分子質(zhì)量的范圍從幾百萬到100以下。近年來，凝膠色譜也廣泛用于分離小分子化合物。化學(xué)結(jié)構(gòu)不同但相對(duì)分子質(zhì)量相近的物質(zhì)，不可能通過凝膠色譜法達(dá)到*的分離純化的目的。凝膠色譜主要用于高聚物的相對(duì)分子質(zhì)量分級(jí)分析以及相對(duì)勿子質(zhì)量分布測(cè)試。目前已經(jīng)被生物化學(xué)、分子生物學(xué)、生物工程學(xué)、分子免疫學(xué)以及醫(yī)學(xué)等有關(guān)領(lǐng)域廣泛采用，不但應(yīng)用于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究，而且已經(jīng)大規(guī)模地用于工業(yè)生產(chǎn)。

　　凝膠色譜法的原理

　　凝膠色譜是根據(jù)多孔凝膠對(duì)不同大小分子的排助效應(yīng)進(jìn)行分離。

　　樣品在多孔凝膠柱中隨著流動(dòng)相的移動(dòng)，待分離的組分沿凝膠顆粒間的孔隙移動(dòng)，大分子移動(dòng)路徑較短，先流出色譜柱，小分子由于擴(kuò)散進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部，遷移路徑長(zhǎng)，后流出色譜柱，實(shí)現(xiàn)分離。

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