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色譜柱規(guī)格選擇應(yīng)考慮哪些因素

2015-12-24　閱讀(2109)

色譜是一種分離分析手段，分離是核心，因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。對(duì)色譜柱的要求是柱效高、選擇性好，分析速度快等。市售的用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質(zhì)的鍵合相、氧化鋁、有機(jī)聚合物微球（包括離子交換樹(shù)脂）、多孔碳等，其粒度一般為3,5,7,10μm等，柱效理論值可達(dá)5~16萬(wàn)/米。對(duì)于一般的分析只需5000塔板數(shù)的柱效；對(duì)于同系物分析，只要500即可；對(duì)于較難分離物質(zhì)對(duì)則可采用高達(dá)2萬(wàn)的柱子，因此一般10~30cm左右的柱長(zhǎng)就能滿足復(fù)雜混合物分析的需要。在選擇色譜柱規(guī)格時(shí)應(yīng)考慮下列因素：① 色譜柱內(nèi)徑：樣品的上樣要與色譜柱的交叉截面面積相對(duì)稱，要選擇色譜柱的內(nèi)徑要適合于樣品的上樣量。② 填料的粒徑：越小的粒徑具有越高的柱效，但是價(jià)格更高，并且?guī)?lái)更高的柱壓，要求設(shè)備的硬件具備更高的壓力耐受性。在被測(cè)組分的色譜峰與其它色譜峰非常靠近時(shí)，就需要更高的柱效，此時(shí)較小粒徑的色譜填料就顯得非常有用。相反，越大的粒徑則柱效越低，但價(jià)格也相對(duì)較低，同時(shí)對(duì)設(shè)備的要求也不高。③ 色譜柱長(zhǎng)度：越長(zhǎng)的色譜柱具有越高的柱效和更高的樣品承載量，但是柱壓將會(huì)更高，同時(shí)分離時(shí)間可能會(huì)更長(zhǎng)

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