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技術(shù)文章
細胞裂解方法及細胞裂解液的特點
點擊次數(shù)：1768 發(fā)布時間：2016-10-9
細胞裂解方法包括化學裂解、酶裂解和機械裂解。化學裂解和酶裂解通常是比較溫和的方法，通常會很少使DNA斷裂。這兩種方法（包括SDS和溶菌酶處理等）提取純化DNA中常用的方法。機械裂解可以更均一的裂解細胞，同化學裂解相比，機械處理具有更高的裂解效率和更低的選擇性。機械處理可以更劇烈和全面的裂解細胞，但也會造成DNA的斷裂。常用的方法是裂解液處理法
細胞裂解液的主要目的：1.利用去污劑破壞脂質(zhì)雙分子層，破裂細胞；2. 溶解蛋白；3. 蛋白變性使其穩(wěn)定；4. 抑制蛋白酶活性
含有多種細胞裂解成分和蛋白酶抑制成分，可以在非變性或變性條件下迅速裂解組織或培養(yǎng)細胞，使之釋放出細胞內(nèi)蛋白，用于后續(xù)實驗。它具有以下優(yōu)點：
1.快速裂解，多種裂解成分經(jīng)過精心優(yōu)化，能快速使細胞裂解。
2.能程度地保留蛋白天然結(jié)構(gòu)和功能，主要用于免疫沉淀和免疫共沉淀，還可以用于蛋白活性檢測（信號傳遞研究和酶動力學檢測）和Western Blot等各種后續(xù)實驗。
3.裂解細胞的效率更高，主要用于對抗原空間構(gòu)型不敏感的免疫共沉淀實驗，還可以用于Western Blotting。適用于培養(yǎng)細胞（包括懸浮細胞）和新鮮組織。