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技術(shù)文章
組織細(xì)胞內(nèi)抗原的固定性
點擊次數(shù)：1660 發(fā)布時間：2017-4-13
組織細(xì)胞內(nèi)抗原的固定是免疫酶標(biāo)和非標(biāo)記免疫酶組織化學(xué)方法中的重要環(huán)節(jié)。經(jīng)過固定，可以達到如下目的：1.標(biāo)本在玻片上的吸著力增加；2.標(biāo)本所含的類脂和蠟質(zhì)等成分可以除去，從而有利于抗原與酶標(biāo)記抗體的結(jié)合；3.標(biāo)本的保存時間可以增長，組織切片固定后，在－20℃，可以存放一年以上而不改變免疫酶技術(shù)的染色；組織內(nèi)有關(guān)抗原不同，則所用固定劑與固定方法也隨之改變。
丙酮和乙醇是常用的兩種固定劑。但對于許多病毒與細(xì)菌的定位研究，選擇丙酮和四氯化化碳作為固定劑是zui合適的；對于可溶性蛋白抗原的定位，常用乙醇；對于多糖，則用8%－10%福爾馬林，而不用乙醇與丙酮等有機溶劑。
對于植物病毒材料的固定，丙酮用得zui多，乙醇次之。因為丙酮對病毒的抗原性損害為zui小，但對于那些不穩(wěn)定的病毒，則應(yīng)避免固定。
在應(yīng)用免疫酶技術(shù)時，固定處理對酶的活性的影響也得心中有數(shù)。許多固定劑對抗原的活性都 會有所損害，例如，福爾馬林對蛋白抗原的固定造成抗原性的破壞非常明顯。因此，對福爾馬林的使用必須嚴(yán)格控制濃度，一般使用的福爾馬林濃度為10%，盡管如此，對抗原的抗原性還是有損害，所以必須進行抗原修復(fù)。