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對于血清的研究
點擊次數(shù)：1911 發(fā)布時間：2017-8-29
血清對于在傳統(tǒng)培養(yǎng)基配方中生長和增殖的大多數(shù)細胞系來說是需要的，因為大多數(shù)單獨的培養(yǎng)基并不能提供細胞生長所需要的全部營養(yǎng)，如MEM培養(yǎng)基，較為常用的量為8％～10％的比例，原代培養(yǎng)使用量為15%～20%，而特殊的低血清培養(yǎng)基血清量可降至3％左右，細胞的形態(tài)和功能不受影響。
血清是非常復雜的混合物，成分多樣，對細胞生長具有促進作用：
1）提供基本營養(yǎng)物質，如氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等，是細胞生長必須的物質；
2）提供激素和各種生長因子，如胰島素、腎上腺皮質激素（、地塞米松）、類固醇激素（雌二醇、睪酮、孕酮）、成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等；
3）提供結合蛋白，可攜帶重要的低分子量物質，如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等，轉鐵蛋白攜帶鐵，在細胞代謝過程中起重要作用；有些情況下結合蛋白能與有毒金屬和熱原質結合，起到解毒作用；
4）血清能提供促接觸和伸展因子，使細胞貼壁免受機械損傷，對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用；
5）能夠維持培養(yǎng)基的pH 值，起酸堿緩沖液作用；
6）有一些細胞，如內皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的，現(xiàn)在則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經(jīng)被廣泛用于貼壁細胞的消化傳代；
7）血清蛋白形成了血清的粘度，可以保護細胞免受機械損傷，特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時，粘度起到重要作用；
8）血清還含有一些微量元素和離子，它們在代謝穩(wěn)定和解毒中起重要作用。
但是血清的加入也帶來了很多問題：
1）血清的成分可能有幾百種之多，目前對其準確的成分、含量及其作用機制仍不清楚，尤其是對其中一些多肽類生長因子、激素和脂類等尚未充分認識，這給研究工作帶來許多困難；
2）血清都是批量生產(chǎn)，各批量之間差異很大，這種差異來源于不同的制備方法和除菌方法、動物的年齡差別及血清的儲存條件等，而且與取血動物的來源關系密切。不同的牧場、不同的氣候天氣及其他環(huán)境因素都可能影響血清的質量。要保證每批血清的相似性極為困難，從而使實驗的標準化和連續(xù)性受到限制。因此選好了一種血清就要盡可能長期使用它。在需要更換時，也要盡量保持與原有的一批血清相似?，F(xiàn)在很多公司都提供血清預留，你一旦選定了某個批次的血清，備足一年的量，這樣可以避免很多麻煩；
3）對大多數(shù)細胞，在體內狀態(tài)，血清不是它們接觸的生理學液體，只是在損傷愈合以及血液凝固過程中才接觸血清，因此使用血清有可能改變某種細胞在體內的正常狀態(tài)，血清可能促進某些細胞的生長（成纖維細胞）同時抑制另一類細胞生長（表皮細胞）；
4）血清含一些對細胞產(chǎn)生毒性的物質，如多胺氧化酶，能與來自高度繁殖細胞的多胺反應（如精胺、亞精胺）形成有細胞毒性作用的聚精胺，補體、抗體、細菌毒素等都會影響細胞生長，甚至造成細胞死亡；
5）血清取材中可能帶入支原體、病毒，如具有爭議的黑膠蟲，對細胞產(chǎn)生潛在影響；