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技術(shù)文章

細胞培養(yǎng)中支原體污染的救星

點擊次數(shù):2490 發(fā)布時間:2019-6-20

 

細胞培養(yǎng)中支原體污染的救星來啦

支原體,又稱霉形體,是一種能夠自我復制的小的原核微生物。

支原體細胞中可見的細胞器是核糖體(支原體是原核細胞,原核細胞的細胞器只有核糖體)。沒有細胞壁,所以細胞形態(tài)不固定,可以有多種變化,但可以在培養(yǎng)基上形成極小的菌落。由于不具細胞壁,許多常見的抗生素,如盤尼西林或β-內(nèi)酰胺類抗生素對支原體是無效的。支原體是寄生生物,但同時也具有腐生功能。

支原體的大小為0.1~0.3um,可通過濾菌器,常給細胞培養(yǎng)工作帶來污染的麻煩。

支原體污染是細胞培養(yǎng)時常見的、較嚴重的一種污染;它也是利用細胞培養(yǎng)進行生物學研究中遭遇的主要的、棘手的問題之一。有數(shù)據(jù)顯示,大約有30-63%的培養(yǎng)細胞曾經(jīng)或正經(jīng)歷支原體污染。常見的污染源有:有血清【精氨酸支原體(M.arginini)】、豬鼻支原體(M.hyorhinis)、萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)】,實驗室工作人員【口腔支原體(M.orale)、唾液支原體(M.salivarum)】等。

支原體污染一般無法通過肉眼進行識別,并且他們也不常使被污染的細胞或者培養(yǎng)基發(fā)生肉眼可辨的變化。很多支原體污染發(fā)展非常緩慢,不會引起宿主細胞死亡,但是它們的存在依然會影響許多參數(shù),終導致不可信的或者錯誤的實驗結(jié)果。這些影響包括:1) 細胞代謝;2)細胞生長;3)細胞活力;4)細胞形態(tài);5)DNA、RNA及蛋白質(zhì)合成,造成這些變化的原因可能是:支原體基因產(chǎn)物如酶、毒素等;支原體利用培養(yǎng)基、宿主細胞組分生長,及由于其生長導致的PH等的變化。因此對培養(yǎng)的細胞進行常規(guī)的、定期的支原體污染檢測時非常有必要的。


羅氏支原體污染檢測試劑盒——Mycoplasma PCR ELISA

*的靈敏度:每次反應可檢測低至1-10fg的DNA,約1-20基因拷貝(至少103cfu/ml)

寬泛的檢測范圍:可用于檢測各類支原體,無膽甾原體及尿素支原體

極為簡便:通用型檢測方法,適用于各類支原體的檢測

快速得到結(jié)果:檢測可在1天內(nèi)完成

操作簡便適用于大樣本量:即用型PCR 預混液和ELISA檢測步驟,保證了檢測反應的速度


羅氏支原體去除試劑——BM-Cyclin

BM-Cyclin可有效去除細胞培養(yǎng)中發(fā)生的支原體污染

無明顯的細胞毒副作用

使用簡便,溶解后可處理的培養(yǎng)液體積可達2500ml

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DAPI

10236276001

10 mg

848

 

 

Mycoplasma PCR ELISA

11663925910

1 kit (96 reactions)

7361

 

 

BM Cyclin

10799050001

37.5 mg (for 2 x 2.5 L medium)

1817

 

 

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