ELISA試劑盒標本的重復凍融所發(fā)生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子發(fā)生損壞效果，然后導致假陰性成果。凍融標本的混勻亦應留意，不要進行劇烈振動，重復倒置混勻即可。標本在保留中如呈現(xiàn)細菌污染所形成的的混濁或絮狀物時，應離心沉積后取上清檢查。一些細菌的內源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會對用相應酶作符號的測定方法發(fā)生非特異性干擾。

ELISA試劑盒血清標本如是以無菌操作別離，則能夠在2～8℃下保留一周，如為有菌操作，則主張冰凍保留。要留意防止呈現(xiàn)嚴峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團，其有相似過氧化物的活性。在以HRP為符號酶的ELISA測定中，如血清標本中血紅蛋白濃度較高，則其就很簡單在溫育過程中吸附于固相，然后與后邊加入的HRP底物反應顯色。

ELISA試劑盒樣本的收集及血清別離中要留意盡量防止細菌污染，一則細菌的生長，其所排泄的一些酶也許會對抗原抗體等蛋白發(fā)生分化效果。樣本的長期保留，應在-70℃以下。