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研域(上海)化學(xué)試劑有限公司
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酶聯(lián)免疫試劑盒操作注意事項

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 酶聯(lián)免疫試劑盒(Elisa)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定,易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,目前已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。
試劑盒操作看似簡便,但要做到十分卻也是個技術(shù)活。它對實驗室操作的環(huán)境以及操作人員的操作的熟練程度有著較高的要求。由于大部分的試驗操作步驟都是由實驗人員來完成的,人為的誤差相對嚴(yán)重一些。再此本人結(jié)合了自己的工作實踐向大家分享一下酶聯(lián)免疫試劑盒操作時的注意事項。
?實驗室的環(huán)境要干凈,防止空氣中的一些細(xì)菌或粉塵對實驗造成干擾。?一般的酶聯(lián)免疫試劑盒中的酶標(biāo)抗體是以辣根過氧化物酶(HRP)進(jìn)行標(biāo)記
的。因此要求樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因為NaN3是HRP的抑制劑。?如果樣本是血清,應(yīng)該充分離心,不得有顆粒。
?試劑盒應(yīng)在保質(zhì)期內(nèi)使用。不同批次的試劑盒中的溶液不得混用。?在進(jìn)行酶聯(lián)免疫實驗之前,應(yīng)該將試劑盒放置室溫平衡30min以上。?稀釋溶液時,應(yīng)按照說明書的要求進(jìn)行稀釋。盡量選用去離子水或雙蒸
水進(jìn)行稀釋。
?要正確使用移液器,吸取液體要,槍頭上不得留有氣泡。吸取不同的液
體時,要注意更換槍頭。
?加樣時要懸臂加樣,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸。
?建議所有的樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。?孵育時需將微孔用封板膜或保鮮膜封好,防止水分的蒸發(fā)。且封板膜不得重
復(fù)使用。
洗板時,要注意防止孔間的交叉污染。
?由于底物顯色劑對光較敏感,因此進(jìn)行顯色時,應(yīng)注意避光。
?底物顯色劑為TMB,應(yīng)避免與皮膚接觸。終止液為2M濃硫酸,具有腐蝕
性,應(yīng)避免與皮膚接觸。
?酶標(biāo)儀使用前,應(yīng)先預(yù)熱30min。讀取結(jié)果前,輕輕震蕩,使溶液均一。讀
數(shù)據(jù)時應(yīng)擦干酶標(biāo)板底部,且孔內(nèi)不能有氣泡。
?酶標(biāo)包被板開封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。

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