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臨床ELISA測定中可能會出現(xiàn)的問題

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盡管ELISA測定的操作步驟非常簡單,但有可能會影響測定結(jié)果的因素卻較多,分布在測定操作的各步之中,尤以加樣、溫育和洗板為甚。為幫助大家分析查找測定中出現(xiàn)問題的可能原因,特對常見問題及原因歸納總結(jié)于下表。   
臨床ELISA測定中可能會出現(xiàn)的問題及可能的原因問題 
可能的原因(非試劑盒本身的原因) 

1.弱陽性質(zhì)控樣本檢測不出 溫育的時(shí)間或溫度不夠;顯色反應(yīng)時(shí)間太短;所用配制緩沖液的蒸餾水有問題 
2.測定的重復(fù)性差 (相同樣本兩次測定結(jié)果不一致) 這是典型的由測定操作引起的問題,包括 
(1)加樣本及試劑量不準(zhǔn);孔間不一致; 
(2)加樣過快,孔間發(fā)生污染; 

(3)加錯樣本; 

(4)加樣本及試劑時(shí),加在孔壁上部非包被區(qū); 
(5)不同批號試劑盒中組分混用; 
(6)溫育時(shí)間、洗板、顯色時(shí)間不一致; 
(7)孔內(nèi)污染雜物; 
(8)酶標(biāo)儀濾光片不正確; 

(9)血清標(biāo)本未*凝固即加入,反應(yīng)孔內(nèi)出現(xiàn)纖維蛋白凝固或殘留血細(xì)胞,易出現(xiàn)假陽性反應(yīng)等。
 3.白板 
(陽性對照不顯色) 
(1)漏加酶結(jié)合物; 

(2)洗板液配制中出現(xiàn)問題,如量筒不干凈,含酶抑制物(如疊氮鈉)等。 
(3)漏加顯色劑A或B; 
(4)終止劑當(dāng)顯色劑使用。 

4.全部板孔均有顯色 
(1)洗板不干凈; 
(2)顯色液變質(zhì); 

(3)加底物的吸光受酶污染; 
(4)洗板液受酶等污染。
我公司代理美國RDelisa試劑盒,同時(shí)在標(biāo)準(zhǔn)品、抗體、血清、生物試劑等方面進(jìn)行深入研發(fā),國慶新產(chǎn)品已經(jīng)上市,歡迎電詢我公司。

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