人胚胎生殖細胞體外培養(yǎng)條件的優(yōu)化及細胞移植實驗的研究目

優(yōu)化人胚胎生殖細胞（EG細胞）的體外培養(yǎng)體系，并將生長狀態(tài)良好的傳代的人EG細胞移植用于大鼠心肌梗死模型的 治療 ，探討人胚胎生殖細胞進行異種移植對大鼠心肌梗死的治療機制。方法：取5~10周人胚胎生殖腺嵴和背側(cè)腸系膜，用添加和不添加細胞因子的兩種培養(yǎng)體系對比進行組織塊原代及傳代培養(yǎng)，選取生長情況良好的傳至第4代的人EG細胞，移植到急性心肌梗死大鼠的梗死心肌周圍，分別于移植后1天、1、2、4周處死大鼠，以鼠抗人細胞核抗體MAB1281作為示蹤劑[1]，通過免疫組化方法檢測移植細胞的分布。結(jié)果：在培養(yǎng)液中添加LIF和b-FGF后原代及傳代培養(yǎng)的人EG細胞生長旺盛，形成集落更早，傳到第4代形成的集落體積變化不大；移植組人EG細胞在移植后1天、1周、2周、4周均可以在心梗區(qū)域觀察到MAB1281陽性細胞。結(jié)論：添加LIF和b-FGF的培養(yǎng)體系是更的人EG細胞培養(yǎng)體系。人EG細胞可異種移植，人EG細胞在大鼠心肌梗死處由心外膜層逐漸向心肌層遷移。