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ELISA試劑盒試驗中各種問題的解決方案

時間:2018-1-8閱讀:1223
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ELISA試劑盒實驗中常會遇到這些疑問:    
1. 溫育條件紛歧致,恒溫箱溫育較水浴顯色深,OD值高出0.1-0.15,均選用恒溫箱。如用水浴水溫應(yīng)控制在37℃。    
2. 樣品數(shù)量紛歧,加樣時刻長短紛歧。當(dāng)重復(fù)某一樣品時,加樣時刻盡可能與初度靠近。    
考慮到有些客戶沒有實驗設(shè)備,我公司還可以供給代測效能,只需付試劑盒的費用,代測是免費的哦!
間接法 :此測定方法與直接法類似,紛歧樣在于一級抗體沒有酶符號,改用酶符號的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。    
雙抗體夾心法 :被檢查的抗原包被在兩個抗體之間,其間一個抗體將抗原固定于固相載體上,即捕捉抗體。
ELISA試劑盒另一個則是檢查抗體,此抗體可用酶符號后直接測定抗原的量;或不符號,再透過酶符號的二級抗體來測定抗原的量。
這兩種抗體有必要留心選擇,才可防止交互反響或競賽一樣的抗原聯(lián)絡(luò)部位。        
競賽法:樣本里的抗原(悠閑抗原)和純化并固定在固相載體上的抗原(固定抗原)一同競賽一樣的抗體,當(dāng)樣品里的悠閑抗原越多,就可以聯(lián)絡(luò)越多的抗體,而固定抗原就只能聯(lián)絡(luò)到較少的抗體,反之亦然。
經(jīng)清潔進程,洗去悠閑抗原和抗體的復(fù)合物,只留下固定抗原和抗體的復(fù)合物,拿來與只需固定抗原的對照組效果相比較,根據(jù)呈色差異就可計算出樣品里的抗原含量。
ELISA試劑盒直接法 :將抗原直接固定在固相載體上,參加酶符號的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。

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