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當(dāng)前位置:研域(上海)化學(xué)試劑有限公司>>公司動(dòng)態(tài)>>ELISA試劑盒綜合問題解答(三)
在做ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)過程中,難免會(huì)遇到各種不同的問題,下面是小編整理的實(shí)驗(yàn)條件選用:
如何選擇合適的陽性對(duì)照?
陽性對(duì)照的基本組成應(yīng)該盡量與檢測樣本的組成一致,一般陽性對(duì)照多以含蛋白保護(hù)劑的緩沖液為基質(zhì),加入一定量的待檢物質(zhì).比如,以人血清為標(biāo)本的測定,陽性對(duì)照多用確定的病人血清或者以復(fù)鈣人血漿為原料加入一定量標(biāo)準(zhǔn)品.
如何選擇合適的陰性對(duì)照?
陰性對(duì)照的基本組成也應(yīng)該盡量與檢測樣本的組成一致,先行檢測確定其中不含待檢物質(zhì).比如,檢測人血清標(biāo)本時(shí),陰性對(duì)照應(yīng)該選擇正常人血清;檢測免疫動(dòng)物血清中抗體效價(jià)時(shí),陰性對(duì)照應(yīng)該選擇該動(dòng)物的免疫前血清.
如何正確使用酶結(jié)合物?
1.酶結(jié)合物的稀釋液
在稀釋液中常加入高濃度的無關(guān)蛋白質(zhì)(例如1%BSA或5%脫脂奶粉),通過競爭抑制酶結(jié)合物在固相載體上的非特異性吸附.一般還加入能夠抑制蛋白質(zhì)吸附于塑料表面的非離子型表面活性劑,如吐溫20(0.05%的濃度較為適宜).
2.正確稀釋酶結(jié)合物
酶結(jié)合物的合適工作濃度需要通過預(yù)實(shí)驗(yàn)來確定,濃度過高易導(dǎo)致本底偏高,濃度過低則會(huì)導(dǎo)致陽性信號(hào)的減弱.
酶結(jié)合物在使用前稀釋,稀釋后的酶結(jié)合物不宜長期保存,因?yàn)榈蜐舛鹊拿附Y(jié)合物極易失活.
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1. 所購產(chǎn)品均質(zhì)量保證,有任何質(zhì)量方面的問題,一律免費(fèi)包換!
2. ELISA試劑盒提供質(zhì)量檢測報(bào)告及售前售中售后服務(wù)!
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