古人有云：學(xué)知不足，業(yè)精于勤。好的技術(shù)自有不朽的能力?？蒲兄肥侨俗叱鰜?lái)的，怎么走好這條路?學(xué)習(xí)是關(guān)鍵，在學(xué)習(xí)的道路上，只有歷經(jīng)過(guò)風(fēng)雨和磨難的人，方能走向人生的。今天特整理一些相關(guān)ELISA技術(shù)教學(xué)文章，下面就讓我們了解如何有效的學(xué)習(xí)ELISA實(shí)驗(yàn)技。
一，ELISA試劑盒在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍可概括四個(gè)方面：
1、免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。
2、研究抗酶抗體的合成。
3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。
4、定量檢測(cè)體液中抗原或抗體成份。
二，ELISA試劑盒的基本原理有三條：
（1）抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫學(xué)活性；
（2）抗原或抗體可通過(guò)共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物，而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性；
（3）酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后，可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來(lái)判定是否有免疫反應(yīng)的存在，而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的，因此，可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果。
由于ELISA法一方面是建立在抗原與抗體免疫學(xué)反應(yīng)的基礎(chǔ)上，因而，具有特異性。而另一方面又由于酶標(biāo)記抗原或抗體是酶分子與抗原或抗體分子的結(jié)合物，它可以催化底物分子發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生放大作用，正因?yàn)榇朔N放大作用而使本法具有很高的敏感性。因此，ELISA法是一種既敏感又特異的方法。

四，ELISA試劑盒存在的問(wèn)題
從以上的簡(jiǎn)單介紹中可以看出，ELISA法由于本身所具備的*性，是一項(xiàng)很有發(fā)展前途的實(shí)驗(yàn)性與血清學(xué)診斷方法，而且應(yīng)用的領(lǐng)域也越來(lái)越廣泛。但是我們認(rèn)為ELISA不是萬(wàn)應(yīng)良方，用它來(lái)代替一切，這是不當(dāng)?shù)?。因?yàn)镋LISA法還有局限性：
1、由于ELISA所用的抗原大部分還是混合的可溶性抗原，所以對(duì)同一微生物寄生蟲(chóng)或其他物質(zhì)不同部位的抗原還沒(méi)有分開(kāi)。
2、內(nèi)源性過(guò)氧化酶的普遍存在，如人腦組織中，呼吸道分泌物的炎癥細(xì)胞中及某些病毒的組織培養(yǎng)中均有內(nèi)源性過(guò)氧化物酶的活力，常不易除去，如果用某些方法除去時(shí)，則病毒的抗原性亦受到破壞，對(duì)于用ELISA檢測(cè)不利。
3、對(duì)ELISA法的非特異性評(píng)價(jià)的資料尚不夠完善，因此，對(duì)出現(xiàn)一些非特異性反應(yīng)的時(shí)候，往往不易解釋。
4、固相載體的質(zhì)量常不統(tǒng)一，主要是原料及制備工藝還不一致，致使不同批號(hào)的固相載體有時(shí)本底值較高，有時(shí)吸附性能很差，影響試驗(yàn)結(jié)果。
5、試劑不統(tǒng)一，現(xiàn)在處于“八仙過(guò)海，各顯神通”，標(biāo)準(zhǔn)還不能統(tǒng)一。

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